容積感受性Clチャンネルによる傍糸球体でのシグナル伝達機構

体积敏感 Cl 通道的肾小球旁信号转导机制

• 批准号: 09877217
• 负责人: 田島 陽太郎
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Akita University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877217/
• 关键词: pICln; 容積感受性; 塩素イオンチャネル; 腎; アミノアシラーゼ-1; λクリスタリン; 腎タンパク; アクチン

(1)pIClnの細胞内局在の動態:免疫組織化学による観察によって、ラットではpIClnは近位尿細管では細胞質に遠位尿細管では管腔面の膜に存在することを観察した.(2)ブタ腎由来の株細胞LLC-PK1を用いた実験では、pIClnは細胞質内に存在し核及びその周辺に密度が高く存在した.表面膜には存在しない.(3)細胞下分画を行い、イムノプレット法で検討したところ、pIClnは不溶画分と可溶画分に約50%ずつ存在した.(4)細胞を低浸透圧に曝すと、5分以内に不溶性pIClnの存在比は低下し、可溶pIClnの存在比が上昇した.(5)リコンビナントpIClnを合成し、結合タンパクを検索したところ、極めて強固に結合しているタンパクが5種分離出来た.その中の1つはアクチンであった.(6)pIClnとの結合タンパクを生成し分析しているが、グリセルアルデヒド3リン酸脱水素酵素であることが明らかになった.(7)この研究の課程で、腎には腎固有のタンパクとしてアミノアシラーゼに一次構造が類似したタンパクの分離に成功した.(8)腎には腎固有のタンバクとしてλクリスタリンに一次構造が類似したタンパクの分離に成功した.

（1）PICLN的亚细胞定位的动力学：通过免疫组织化学，我们观察到PICLN存在于近端小管中的细胞质中，以及近端小管中腔表面膜的远端小管中存在。 （2）在使用猪肾脏衍生的细胞系LLC-PK1的实验中，PICLN存在于细胞质中，并且在细胞核及其周围环境中高度致密。不在表面膜中。 （3）使用免疫链接方法进行了亚细胞分馏并研究了PICLN，存在于不溶性和可溶性分数中。 （4）当细胞暴露于低渗透压时，不溶性PICLN的丰度比在5分钟内降低，可溶性PICLN可溶，而不溶性PICLN的比率在5分钟内降低。 N的丰度比增加。 （5）合成重组PICLN并搜索结合蛋白时，分离了五种极强结合的蛋白。其中一个是肌动蛋白。 （6）与PICLN的结合蛋白进行并分析，并发现它是3-磷酸甘油醛脱氢酶。 （7）在本研究课程中，我们成功地分离了与氨基酰基类似于肾脏特异性蛋白质的蛋白质相似的蛋白质。 （8）我们成功地将具有与λ晶体相似的蛋白质与肾脏特异性蛋白相似的蛋白质分离。

项目成果

Zhang L, al.: "Purification and characterization of two novel and kidney-specific proteins related to aminoacylase-1 and lambda-crystallin." Clinical and Exprerimental Nephrology. 1・4号. 266-272 (1997)

张 L 等人：“与氨酰化酶 1 和 lambda-晶状体蛋白相关的两种新型肾脏特异性蛋白质的纯化和表征”，临床和实验肾病学 1·4（1997）。

Tao G, et al.: "Expression of 60-kDa and inducible 70-kDa stress proteins in gentamicin-induced acute renal failure." Clinical and Exprerimental Nephrology. 1・4号. 254-260 (1997)

Tai G 等人：“庆大霉素诱导的急性肾衰竭中 60-kDa 和诱导型 70-kDa 应激蛋白的表达”。临床和实验肾病学 1·4 (1997)。