単球・マクロファージの寛容誘導による関節炎モデル・マウスの治療

通过诱导单核细胞和巨噬细胞耐受治疗关节炎模型小鼠

• 批准号: 08877083
• 负责人: 河部 庸次郎
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877083/
• 关键词: U937; アポトーシス; NF-kB; PDTC; caspase; XIAP; 寛容; 単球・マクロファージ; IL-1; TNF; LPS; SLPI; CD14; 慢性関節リウマチ; 単球; マクロファージ; HIL-V-I関連脊髄症

単球・マクロファージ系の樹立細胞であるU937細胞表面におけるCD14およびCD86の発現はphorbor myristate acetate(PMA)刺激により誘導された。PMAによって分化誘導されたU937はその培養上清中に種々のサイトカイン、即ちIl-1,Il-6,IL-8,TNFαを著しく産生することが認められた。このようなPMA刺激はU937細胞内での核内転写因子NF-kBの核内への移行を誘導することをelectrophoretic mobility shift assayによって確認した。そこで、NF-kBの抑制剤であるpyrolidine dithiocarbamate(PDTC)をあらかじめ投与しておくと、上記のPMAによるU937の活性化を抑えるのみならず、一部の細胞を細胞死(アポトーシス)に陥らせた。これは一連の細胞死シグナルのなかでも蛋白分解酵素であるcaspase-3の活性化によって起こっていることが、その酵素活性およびWestern blotによって確認された。PMA刺激はPDTCによるアポトーシスを回避する方向に働くことが示され、caspase-3の活性化そのものも抑制されることが解った。このようにして、PMA刺激時のU937細胞は活性化され、同時にNF-kBの発現を増強することによって、XIAPの発現を誘導しアポトーシスを回避するように働くことが解った。またこれらの細胞内メカニズムに基づいて、単球・マクロファージにPMA再刺激を行うことにより単球・マクロファージの寛容誘導の機構が示唆された。

U937 细胞（单核细胞/巨噬细胞谱系的已建立细胞）表面 CD14 和 CD86 的表达是通过用佛波肉豆蔻酸乙酸酯 (PMA) 刺激诱导的。发现经PMA诱导分化的U937在其培养上清液中显着产生多种细胞因子，即Il-1、Il-6、IL-8和TNFα。我们通过电泳迁移率变动测定证实，这种 PMA 刺激诱导核转录因子 NF-kB 易位到 U937 细胞的细胞核中。因此，如果提前给予NF-kB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)，不仅会抑制PMA引起的U937的激活，还会导致部分细胞发生细胞死亡(细胞凋亡)。酶活性和Western blot证实这是由一系列细胞死亡信号中的蛋白水解酶caspase-3激活引起的。 PMA 刺激被证明可以避免 PDTC 诱导的细胞凋亡，并且 caspase-3 激活本身也受到抑制。这样，我们发现U937细胞在PMA刺激下被激活，同时增强NF-kB的表达，从而诱导XIAP的表达，从而起到避免细胞凋亡的作用。此外，基于这些细胞内机制，提出了通过用 PMA 重新刺激单核细胞和巨噬细胞来诱导单核细胞和巨噬细胞耐受的机制。

项目成果

K.Migita, K.Eguchi,Y.Kawabeet al.: "Apoptosis induction in human peripheral blood T lymphocytes by high-dose steroid therapy" Transplantation. 63・4. 583-587 (1997)

K. Migita、K. Eguchi、Y. Kawabeet al.：“高剂量类固醇疗法诱导人外周血 T 淋巴细胞凋亡” 移植 63・4。

Kawakami,A et al.: "CD4+ T-cell-mediated cytotoxity against staphylococcal enterotoxin B-pulsed synovial cells" Immunology. 95. 39-46 (1998)

Kawakami,A 等人：“CD4 T 细胞介导的针对葡萄球菌肠毒素 B 脉冲滑膜细胞的细胞毒性”免疫学。

K.Migita, K.Eguchi, M.Tominaga, Y.Kawabe et al: "β2-microglobuline induces stromelysin production by human synovial fibroblast" Biochem Biophys Res Co. 239. 621-625 (1997)

K.Migita、K.Eguchi、M.Tominaga、Y.Kawabe 等人：“β2-微球蛋白诱导人滑膜成纤维细胞产生溶基质素”Biochem Biophys Res Co. 239. 621-625 (1997)

A.Kwwakami, K.Eguchi, N.Matsuoak, Y.Kawabe et al: "Modulation of Fas-mediated apoptosis of human thyroid epithelial cells by IgG from patients with Graves'disease (GD) and idiopathis myxoedema" Clin Exp Immunol. 110・3. 434-439 (1997)

A.Kwwakami、K.Eguchi、N.Matsuoak、Y.Kawabe 等人：“Graves 病 (GD) 和特发性粘液性水肿患者的 IgG 对 Fas 介导的人甲状腺上皮细胞凋亡的调节”Clin Exp Nutrition 110。・3。434-439（1997）

Kawakami,A et al.: "Insulin-like growth factor I stimulates proliteration and Fas-mediated apoptosis of human osteoblasts" Biochem Bioph Res Commun. 247. 46-51 (1998)

Kawakami,A 等人：“胰岛素样生长因子 I 刺激人成骨细胞增殖和 Fas 介导的细胞凋亡”Biochem Bioph Res Commun。