膀胱癌の発癌・悪性化過程における腫瘍遺伝子変異と腫瘍免疫応答の関連の解明

阐明膀胱癌发生、恶性进展过程中肿瘤基因突变与肿瘤免疫反应的关系

基本信息

批准号：
22KJ3159
负责人：
尾張拓也
金额：
$ 2.83万
依托单位：
National Cancer Center Japan
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ3159/
关键词：
膀胱がん BBN 自然発がん免疫チェックポイント阻害剤遺伝子発現解析

项目摘要

本研究では、ヒト膀胱がん手術検体ならびに N-Butyl-N-(4- hydroxybutyl)nitrosamine (BBN)誘導膀胱がんマウスモデルを用い、膀胱がんの発がん・悪性化過程における免疫療法に対する耐性獲得機序を解明することを目的とした。まず、BBNにより誘導されるマウス膀胱がんの発がんおよび悪性化過程の遺伝子変異・遺伝子発現の変化の解析を RNAシークエンスならびに whole exome sequence (WES)により網羅的遺伝子解析を行った。その結果、BBNを12週投与時点から膀胱がんの発がんを確認し、20週の投与までに経時的に腫瘍は悪性化を認めることを確認した。腫瘍遺伝子変異に関しては、膀胱がんの TCGA データベースとの比較を行ったが、BBNで誘導される膀胱がんは、TTNやTP53をはじめとしてヒト筋層浸潤性膀胱がんと類似した遺伝子変異を認めた。さらに、RNAシークエンスの結果から、16週以上の投与により、ヒト膀胱がんにおいてより悪性度の高いとされる Basal-Squamous subtype の腫瘍を形成することを明らかとした。BBNを18-20週投与した個体に対して抗PD-1抗体を投与し、奏功・非奏効個体における網羅的遺伝子解析を行い、Basal-Squamous subtype膀胱がん特有の免疫チェックポイント阻害剤の耐性に関与する遺伝子発現の比較を行った。ヒト膀胱がんにおける免疫チェックポイント阻害剤の有効性を検証した臨床試験データと共通した治療抵抗性に関与する特有の遺伝子発現変化を同定したため、これらの遺伝子のがん免疫療法耐性メカニズムの解明を進める。

在这项研究中，我们使用人膀胱癌手术标本和N-丁基-N-(4-羟丁基)亚硝胺(BBN)诱导的膀胱癌小鼠模型来研究膀胱癌发生和恶性进展过程中免疫治疗耐药性的获得目的是阐明其机制。首先，我们利用RNA测序和全外显子组测序（WES）进行全面的遗传分析，以分析BBN诱导的小鼠膀胱癌发生和恶性转化过程中的基因突变和基因表达的变化。结果，从施用BBN的第12周起，证实了膀胱癌的发病，并且到施用的第20周，肿瘤随着时间的推移而恶变。关于肿瘤基因突变，我们与膀胱癌的TCGA数据库进行了比较，发现BBN诱发的膀胱癌存在与人类肌层浸润性膀胱癌类似的基因突变，包括TTN和TP53我承认。此外，RNA测序结果显示，给药16周或更长时间会导致基底鳞状细胞亚型肿瘤的形成，该亚型被认为是人类膀胱癌的恶性程度较高的类型。对接受 BBN 治疗的个体施用抗 PD-1 抗体 18-20 周，并对有反应和无反应个体进行全面的遗传分析，我们比较了相关基因的表达。由于我们发现了与治疗耐药相关的独特基因表达变化，这些变化在验证免疫检查点抑制剂在人类膀胱癌中的有效性的临床试验数据中很常见，因此我们正在努力阐明这些基因的癌症免疫治疗耐药机制。