Japan-US Research Collaboration on the Development of a Novel Therapeutic Strategy Targeting the Cancer-Associated Collagen to Overcome Treatment-Resistant Cancer Phenotypes.

日美研究合作开发针对癌症相关胶原蛋白的新型治疗策略，以克服治疗耐药的癌症表型。

• 批准号: 21KK0159
• 负责人: 鵜澤 一弘
• 金额: $ 12.15万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (B))
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-10-07 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21KK0159/
• 关键词: Plod2; LH2; collagen cross-link; Collagen Highway; Collagen Barrier; Collagen cross-link; リシン水酸化酵素2; LH2-conditional KOマウス

本研究はゲノム編集技術を基盤として作製したLH2-conditionalノックアウトマウス(LH2-cKO)をもとに、collagen cross-linkの質的・量的な変化の解析を行い、癌周囲のcollagen Highway & Barrier形成のメカニズムを解明し、またそれらを阻害または改変する物質の同定と臨床応用への検証を行うことで、癌の進展と薬剤耐性という癌治療の最重要課題の克服を目指す。癌転移機構の解明だけでなく治療薬についても検討することは臨床的にも社会的にも大きく貢献できるものと確信している。本年度の研究成果としては、LH2-cKOマウスの転写・スプライシング・タンパク質翻訳について各種解析法を用いてコントロールマウスと比較した。LH2-cKOマウスよりcollagenサンプルを抽出し、コントロールマウスと比較したcollagen cross-link解析を、世界で唯一無二のcollagen cross-linkに対する高精度定量解析および構造解析を行える世界的研究拠点である米国 North Carolina大学のYamauchi教授の研究室と共同で行った。解析については、研究協力者として米国 North Carolina大学のYamauchi教授の元へ派遣したポスドクと協力して進めている。さらに、月に1回定期ミーティングを開催しており、実験計画についての盛んな意見交換を行っている。また、マウス胚線維芽細胞(MEF)の樹立に成功しており、今後tamoxifenを作用させ、LH2-KO線維芽細胞を樹立する。さらに、LH2-KOマウスおよびコントロールマウスにB16F10細胞およびSq-1979細胞を左心室注射および大腿骨内注射によって移植し、担癌マウスの作製に成功した。

这项研究旨在克服癌症治疗中最重要的问题：癌症的进展和耐药性，通过分析胶原蛋白交联的定性和定量变化，阐明胶原蛋白高速公路的机制和癌症周围的屏障形成，并识别抑制或修改它们的物质，以及验证临床应用。我们认为，不仅阐明了癌症转移的机制，而且考虑治疗药物会在临床和社会上做出重大贡献。使用各种分析方法将LH2-CKO小鼠的转录，剪接和蛋白质翻译进行比较，将今年的研究结果与对照小鼠进行了比较。从LH2-CKO小鼠中提取胶原蛋白样品，与对照小鼠相比，胶原蛋白的交联分析与北卡罗来纳大学Yamauchi Yamauchi教授合作进行了胶原蛋白样品，该研究中心是世界领先的研究中心，该研究中心可以对世界领先的量化定量和结构性分析进行全球独特的胶原交叉链接。该分析正在与一位博士后合作，该博士后被派往美国北卡罗来纳大学的Yamauchi教授作为研究伙伴。此外，我们每月举行一次定期会议，并积极交换有关实验设计的意见。此外，它已经成功建立了小鼠胚胎成纤维细胞（MEF），现在将使用他莫昔芬建立LH2-KO成纤维细胞。此外，将B16F10细胞和SQ-1979细胞植入LH2-KO小鼠中，并通过左心室注射和毛内注射以成功产生肿瘤的小鼠来对照小鼠。