新生内膜における小胞体ストレスと脂肪酸結合タンパクの関わりの検討

新内膜内质网应激与脂肪酸结合蛋白关系的研究

基本信息

批准号：
26860576
负责人：
石村周太郎
金额：
$ 2.41万
依托单位：
Sapporo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

マウスワイヤー傷害モデルにおける新生内膜の免疫組織化学的染色による検討では小胞体ストレス応答マーカーであるGRP94、PDI、リン酸化IRE1α、リン酸化eIF2αの発現を認め、新生内膜に小胞体ストレスが生じていると考えられた。小胞体ストレスを軽減する薬剤である4-phenylbtirate(4-PBA)とtauroursodeoxicholic acid (TUDCA)の投与は新生内膜形成を抑制し、小胞体ストレスが新生内膜形成に促進的に作用している可能性が考えられた。さらに新生内膜部の血管内皮細胞に脂肪酸結合タンパク４の発現を確認し、小胞体ストレス軽減とともに発現の減少が認められた。詳細な機序の検討のためヒト冠動脈平滑筋細胞(hCASMC)を用いて分子生物学的な検討を行った。血小板由来増殖因子(PDGF)-BBによる増殖/遊走は小胞体ストレス応答のマーカーであるGRP94, Grp78, Pdi, spliced Xbp1の発現増加を伴ない、4-PBA、TUDCAはこれらの発現を有意に抑制した。これと共にERKのリン酸化の抑制と、MTS法、Scratch wound 法で評価したhCASMCの増殖/遊走の有意な抑制が見られたことから、小胞体ストレスを軽減することがhCASMCのPDGFによる増殖/遊走を抑制すると考えられた。また、小胞体ストレスに対する代償機構の主要分子の一つであるXBP1の減少が新生内膜形成やhCASMCの増殖/遊走に与える影響を評価した。Xbp1へテロ欠損マウスにおけるワイヤー傷害モデルにおいては新生内膜形成は有意に増加し、hCASMCにおいてXbp1をノックダウンすることで、PDGF-BBによる増殖/遊走を有意に促進した。また、hCASMCにおけるXbp1のノックダウンはPdgfra, Pdgfrb, Il1b, Il6の発現を有意に増加がみられた。これらのことより小胞体ストレスの血管平滑筋細胞の増殖/遊走、ワイヤー傷害モデルでの新生内膜形成への影響は炎症やPDGF受容体の発現を介したものである可能性が考えられた。

在一项研究中，在小鼠电线损伤模型中使用免疫组织化学染色的研究，GRP94，PDI，PDI，磷酸化的IRE1α和磷酸化的EIF2α的表达，内质网应激反应的标志物，并认为内脑应力是noign的，并且被认为是内脑应变的。给药4-苯基布丁（4-PBA）和牛陶脱氧胆酸（TUDCA），减少内质网应激的药物会抑制新的形成，并且人们认为ER胁迫可能会促进新内膜形成。此外，在新内膜区域的内皮细胞中证实了脂肪酸结合蛋白4的表达，并降低表达以及内质网应激的减少。为了详细的机理研究，使用人冠状动脉平滑肌细胞（HCASMC）进行了分子生物学。通过血小板衍生的生长因子（PDGF）-BB的增殖/迁移不伴随着GRP94，GRP78，PDI，PDI，剪接的XBP1的表达增加，内质网应激反应的标志物，4-PBA，4-PBA和TUDCA显着抑制了这些表达的表达。此外，观察到了通过MTS评估的HCASMC增殖/迁移的抑制作用和对HCASMC增殖/迁移的显着抑制作用，并观察到了刮擦伤口方法，并且人们认为减少内质网应激会抑制HCASMC的增殖/迁移。我们还评估了XBP1减少的影响，XBP1是内质网应激的补偿机制中的主要分子之一，对HCASMC的新内膜形成和增殖/迁移。在XBP1异性缺陷型小鼠中，导线损伤模型中的新内膜形成显着增加，击倒HCASMC中的XBP1显着促进了PDGF-BB诱导的增殖/迁移。此外，HCASMC中XBP1的敲低显着增加了PDGFRA，PDGFRB，IL1B和IL6的表达。这些发现表明，内质网应激对线损伤模型中血管平滑肌细胞的增殖/迁移和新内膜形成的影响可能是通过PDGF受体的炎症和表达来进行的。