卵巣顆粒膜細胞の黄体化に伴うVEGF遺伝子発現のエピジェネティクス制御

卵巢颗粒细胞黄素化过程中VEGF基因表达的表观遗传调控

基本信息

批准号：
16K20192
负责人：
澁谷文恵
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-01 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16K20192/
关键词：
黄体血管新生 VEGF 産婦人科

项目摘要

LHサージ後の黄体形成には速やかな、血管新生が重要である。黄体は妊娠の成立・維持に不可欠な内分泌器官であり、活発なプロゲステロン合成のためにはその基質であるコレステロールや黄体刺激物質を黄体細胞に供給する必要があるし、また合成されたプロゲステロンを血中に運搬するため、黄体には高度に発達した血管網の構築が必要となる。LHサージ前には血管は内莢膜細胞層に限局して見られるが、LHサージ後に基底膜が融解するとともにVascular Endothelial Growth Factor (VEGF) の刺激により血管内皮細胞が増殖し、血管は顆粒膜細胞層へ侵入し、非常に短時間で血管新生が完成する。申請者はLHサージ後の黄体形成に伴う血管新生の経時的変化と、VEGF遺伝子がLHサージを契機として短時間で急速に増加することを既に確認している。近年、遺伝子発現は単に転写因子のみで調節されるのではなく、転写因子の受け手側である遺伝子プロモーター領域の変化、すなわちDNAメチル化やヒストン修飾に代表されるエピジェネティックな調節機構によっても制御されることが明らかとなっている。ヒストン脱アセチル化酵素 (HDAC) やH3K27メチル化酵素であるEZH2は様々な分野で研究が進んでおり、その酵素の制御も徐々に解明されている。しかし、LHサージ後にどのようなヒストン修飾酵素がVEGF遺伝子プロモーター領域にリクルートされ、その領域のヒストン修飾変化に関与しているのかは全くわかっていない。そこで、LHサージによる顆粒膜細胞の黄体化によってVEGF mRNA発現が急速に増加するのに伴い、VEGF遺伝子プロモーター領域におけるDNAメチル化やヒストン修飾などがどのように変化するか、またそれに伴うプロモーター領域のクロマチン構造や各転写因子の結合およびヒストン修飾酵素のリクルートの変化を明らかにする。

LH 激增后，快速血管生成对于黄体形成非常重要。黄体是妊娠建立和维持所必需的内分泌器官，为了积极合成黄体酮，需要向黄体细胞供应其底物胆固醇和叶黄素刺激物质，并转运黄体酮。为了将其合成到血液中，黄体需要构建高度发达的血管网络。 LH激增前，血管局限于内皮细胞层，但LH激增后，由于血管内皮生长因子（VEGF）的刺激，基底膜融化，血管内皮细胞增殖，血管变成颗粒状它侵入细胞层并在极短的时间内完成血管生成。申请人已经确认了LH激增后与黄体形成相关的血管生成的时间变化，以及LH激增引发的VEGF基因在短时间内的快速增加。近年来人们已经明确，基因表达不仅受到转录因子的调控，还受到接受转录因子的基因启动子区域的变化，即DNA甲基化和组蛋白修饰等表观遗传调控机制的影响。明确指出组蛋白脱乙酰酶（HDAC）和H3K27甲基转移酶EZH2正在各个领域进行研究，并且这些酶的调控正在逐渐被阐明。然而，完全不知道LH激增后哪种组蛋白修饰酶被招募到VEGF基因启动子区域并参与该区域的组蛋白修饰变化。因此，我们研究了随着 LH 激增导致颗粒细胞黄素化，VEGF mRNA 表达迅速增加，VEGF 基因启动子区域的 DNA 甲基化和组蛋白修饰如何变化，以及启动子区域如何相应变化，我们将阐明染色质结构、结合的变化。各种转录因子的作用以及组蛋白修饰酶的募集。