補中益気湯の制御性アダプター分子の発現制御を介した粘膜炎症改善メカニズムの解明

通过调节hochuekkito中调节接头分子的表达来阐明改善粘膜炎症的机制

基本信息

批准号：
16K19320
负责人：
回渕修治
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-01 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16K19320/
关键词：
補中益気湯免疫イヌロオリゴ糖抗炎症小腸上皮パイエル板

项目摘要

補中益気湯は、免疫増強と免疫制御の両面的な臨床効果を有するが、その作用メカニズムに不明な点が多く、本質的な薬効成分はほとんど明らかとなっていない。補中益気湯に含有されるイヌロオリゴ糖は、本漢方薬と同様に、炎症性シグナルカスケードの抑制性アダプター分子のIRAK-Mなどの発現を増強し、抗がん剤により誘発される小腸粘膜炎症病態を改善する。そのメカニズムの一つとして、植物性生薬に含まれる多糖およびオリゴ糖が腸管免疫系の司令塔であるパイエル板免疫機能を調節し、そのパイエル板から遊出したリンパ球は脾臓などの造血系へと帰巣することから、呼吸器などの局所粘膜免疫系の免疫機能を調節することが推測されている。本申請課題では、補中益気湯の精製イヌロオリゴ糖を用いて、パイエル板や腸管膜リンパ節免疫細胞などでの制御性免疫機能調節作用へのイヌロオリゴ糖群の関与を解析することとした。まず、イヌロオリゴ糖を経口投与した若齢BALB/cマウス（7週齢、雌）のパイエル板免疫細胞の初代培養を行い、ELISAを用いて各種サイトカインの分泌パターンの測定を行った。その結果、イヌロオリゴ糖によりパイエル板のT細胞からIL-2およびIFN-γの産生が増強されることが示唆された。次に、イヌロオリゴ糖を経口投与したマウスパイエル板でDNAマイクロアレイを用いた網羅的発現解析を行うことで、免疫機能調節においてどのような遺伝子群が関与しているか推測することとした。その結果、炎症や免疫細胞の活性化に関与するサイトカインの遺伝子発現量低下、炎症誘導に関与するカスケードを抑制する因子の遺伝子発現量増加が認められた。以上のことから、イヌロオリゴ糖はパイエル板免疫細胞でサイトカインの分泌パターンの変動や遺伝子発現を抗炎症方向へ調節することで、炎症病態を改善させている可能性が考えられた。

Hochuekkito具有免疫增强和免疫调节的双重临床作用，但其作用机制尚有许多未知之处，其主要药用成分也很大程度上未知。与这种草药一样，Hochuekkito 中含有的菊花低聚糖可增强炎症信号级联的抑制性接头分子 IRAK-M 的表达，抑制抗癌药物引起的小肠粘膜炎症，改善病情。其机制之一是草药中所含的多糖和寡糖调节派伊尔集结的免疫功能，派尔集结是肠道免疫系统的指挥中心，从派尔集结迁移的淋巴细胞转移到脾脏等造血系统由于它们返回巢穴，推测它们调节局部粘膜免疫系统（例如呼吸道中的免疫系统）的免疫功能。在本应用中，我们决定使用来自 Hochuekkito 的纯化犬低聚糖来分析犬低聚糖在派尔氏淋巴结和肠系膜淋巴结免疫细胞中参与调节性免疫功能的调节作用。首先，我们对口服犬寡糖的年轻BALB/c小鼠（7周龄，雌性）的派尔氏集结免疫细胞进行原代培养，并使用ELISA测量各种细胞因子的分泌模式。结果表明，犬寡糖增强派尔氏淋巴结 T 细胞产生 IL-2 和 IFN-γ。接下来，我们使用 DNA 微阵列对口服犬低聚糖处理的小鼠派尔氏淋巴集结进行了全面的表达分析，以推断哪些基因组参与免疫功能调节。结果，观察到参与炎症和免疫细胞活化的细胞因子的基因表达水平降低，以及抑制参与炎症诱导的级联的因子的基因表达水平增加。综上所述，认为犬低聚糖可能通过调节派尔氏集结免疫细胞的细胞因子分泌模式和基因表达的变化，向抗炎方向改善炎症状况。