脂質ラフトにおける膜活性型アミロイドβ蛋白の形成と防御

脂筏中膜活性β淀粉样蛋白的形成和防御

基本信息

批准号：
15016058
负责人：
松崎勝巳
金额：
$ 4.35万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

アルツハイマー病発症の第一段階は可溶性アミロイドβ蛋白(Aβ)の毒性型凝集体への変換と神経細胞への沈着であり、この過程の分子機構の解明とその防御は、本疾患の予防・治療法の開発にとってきわめて重要である。我々は、膜の脂質ラフトにおいて、コレステロール依存的に形成されるガングリオシドのクラスターを可溶性Abetaが認識して結合し、凝集核となるガングリオシド結合型Aβが形成されるとの仮説を立てている。まず、nativeおよび色素(DAC)ラベルAβ-(1-40)を用い、水中およびGM1ガングリオシド/コレステロール/スフィンゴミエリンからなるラフト様膜中で生成するAβ凝集体の特性を解析した。フーリエ変換赤外分光法および蛍光法により、水中およびラフト様膜中で生成する凝集体はともにβシート構造をとるものの,同一の構造ではないことが示唆された。また、水中で生成するAβ凝集体は膜には結合せず,凝集体から解離したモノマーがラフト様膜にのみ結合することが明らかとなった。次に、本研究費で購入した細胞培養装置を用い、ラフト様膜存在下、PC12細胞に対し毒性を示すAβ種が形成されることを見いだした。さらに、ラフト様膜へのAbeta結合を防御する物質の検索を行ったところ、rifampicin、nordihidroguaiaretic acid、[Gly14]-humanin (HUM)に結合抑制効果が見られた。

阿尔茨海默病发病的第一步是可溶性β淀粉样蛋白（Aβ）转化为有毒聚集物并沉积在神经细胞中，阐明这一过程的分子机制及其保护对于预防和治疗阿尔茨海默病具有重要意义。这种疾病对于法律的发展至关重要。我们假设可溶性 Abeta 识别并结合在膜脂筏中以胆固醇依赖性方式形成的神经节苷脂簇，形成神经节苷脂结合的 Aβ，充当聚集核。首先，使用天然标记和染料 (DAC) 标记的 Aβ-(1-40)，我们分析了在水中和由 GM1 神经节苷脂/胆固醇/鞘磷脂组成的筏状膜中形成的 Aβ 聚集体的特征。傅里叶变换红外光谱和荧光分析表明，虽然在水中和筏状膜中形成的聚集体都具有β-折叠结构，但它们的结构并不相同。研究还表明，在水中形成的 Aβ 聚集体不与膜结合，并且从聚集体中解离的单体仅与筏状膜结合。接下来，使用本研究经费购买的细胞培养装置，我们发现对 PC12 细胞有毒的 Aβ 物质是在筏状膜存在的情况下形成的。此外，当我们寻找阻止Abeta与筏状膜结合的物质时，我们发现利福平、去甲二氢愈创木酸和[Gly14]-护脑素(HUM)具有结合抑制作用。