変異型タウ遺伝子導入によるヒト痴呆疾患モデルマウスの作製と解析

导入突变tau基因的人类痴呆症模型小鼠的建立与分析

基本信息

批准号：
15016019
负责人：
原田彰宏
金额：
$ 4.42万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

アルツハイマー病(Alzheimer's disease, AD)の神経病理学的特徴は、老人斑と神経原線維変化であり、これらは、神経細胞死と深い関わりがあると考えられている。近年、タウのアミノ酸の置換やスプライシング異常が神経原線維変化の形成の必要十分条件であることが明らかとなった。変異型タウ蛋白が如何にして神経原線維変化につながるかを解明するため、下記のA、B2つの手法を用いてモデルマウスを作製し、その解析を行っている。A.ヒトの変異型タウcDNAをマウスのタウ遺伝子座に導入する。現在、ヒトのタウcDNAを両方のタウ遺伝子座に導入したマウスを変異型APPのトランスジェニックマウスと交配して、変異型APPを持ち、なおかつヒトの変異型タウ蛋白のみを持つマウスの作製に成功している。現在このマウスの神経病理学的所見を光学、電子顕微鏡的観察により解析中である。将来的には(1)神経細胞数を定量的に計測してPHFと細胞死の関連を解析する(2)神経病理学的変化の前後における遺伝子の発現の違いや、それと細胞死などとの関連をDNAマイクロアレー法によって解析する予定である。B.変異を持つヒトのタウcDNAを神経細胞特異的に過剰発現させるマウスを作製する。Aでは病理症状が出ない可能性もあるため、ヒトのタウcDNAの発現レベルをさらに上げるために、Cre recombinaseを発現する組織や細胞だけでヒトのタウcDNAを過剰発現できるマウスを作製し、そのマウスと神経細胞特異的にCre recombinaseを発現するマウスをかけ合わせて神経細胞特異的に変異型タウを過乗発現させることも試みている。両者を交配したところ、double transgenic mouseは周産期に死亡すると考えられる所見を得たため、神経原線維変化などの病理変化が生じているか、解析する予定である。

阿尔茨海默氏病（AD）的神经病理学特征是老年斑块和神经原纤维缠结，被认为与神经元死亡密切相关。近年来，已经揭示了tau中氨基酸取代和剪接异常是形成神经纤维缠结的必要条件。为了阐明突变tau蛋白如何导致神经纤维缠结，使用以下两种方法A和B制备模型小鼠并进行了分析。 A.人突变tau cDNA被引入小鼠的tau基因座。当前，在两个tau基因座引入人tau cDNA的小鼠已经与转基因小鼠与突变应用程序配对，并成功地用突变型应用程序生产了小鼠，并且只有人突变的tau蛋白。当前，通过光学显微镜和电子显微镜分析了该小鼠的神经病理学发现。将来，我们计划（1）通过定量测量神经元的数量来分析PHF与细胞死亡之间的关系，（2）使用DNA微阵列分析神经病理变化前后基因表达的差异以及该神经病理变化之前和之后的关系和细胞死亡之间的关系。 B.产生特别表达携带突变的人tau cDNA的小鼠。 Since pathological symptoms may not be present in A, in order to further increase the expression level of human tau cDNA, we have also attempted to create mice capable of overexpressing human tau cDNA using only tissues and cells expressing Cre recombinase, and then we have attempted to combine the mice with mice expressing Cre recombinase specifically to overexpress the mutant tau in neuronal-specific manner.当两者交配时，我们发现双重转基因小鼠被认为死亡围产期，因此我们计划分析是否发生了病理变化，例如神经纤维缠结。