微生物酵素による新しい物質変換系の開発

利用微生物酶开发新材料转化系统

基本信息

批准号：
63616005
负责人：
山田秀明
金额：
$ 12.67万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、微生物酵素を用いる物質の合成、変換法を画期的に発展させるべく、各種酵素が人為的制御条件下で発現する合成活性、非天然合成化合物に対して示す変換活性、あるいはアミノ酸、ヌクレオチド、ビタミンなどの代謝に関与する多機能的作用などを解析するとともに、それらの酵素の力価増大を図ることによって種々の有用物質の工業的生産方式の基礎を確立する。さらにキラルな有機化合物を創り出す微妙な酵素機能を精密合成法と組み合わせた独創的生産分野を開拓することを目的とする。本年度の研究実績は以下の通りである。(1)メタノール資化性細菌を用いるセリンの酵素的合成の反応条件と合成に関与する酵素を精製し性質を明らかにした。(2)好熟菌の耐熱性ロイシン脱水素酵素遺伝子をクローニングし、構造遺伝子を解析し、酵素の一次構造を究明した。(3)カルボキシペプチダーゼYおよびPによるジヘプチド合成の反応条件と反応機構を究明した。(4)微生物リパーゼによる油脂のグリセロシス反応によって新規な組成の油脂の合成に成功した。また微生物ホスホリパーゼDによりレシチンからホスファチジルコリンを高純度で得るプロセスを確立した。(5)食用糸状菌のγ-グルタミルトランスペプチダーゼを用いて種々の生理活性をもつγ-グルタミンタウリンの合成を行った。(6)メタン生成細菌よって分泌されたコリノイドの主成分、ゴビンアミド(FB)の微生物活性を調べ、さらにFBのB-12への微生物変換をおこなった。(7)エステラーゼを用いて生理活性物質、1β-メチルカルバペネム、ビタミンD関連物質および抗腫瘍抗生物質リゾキシンの各合成中間体を合成した。(8)酵母およびエステラーゼを用いて抗生物質ペンタレノラクトンメチルエステル、かび胞子形成因子スポロゲンAO1などを合成した。(9)キレート形成に基づくタンパク質の修飾法を開発し、この原理に基づいて、修飾タンバクのリシン-セファデックスへの固定化を実現させた。

In this research, in order to dramatically develop synthesis and conversion methods for substances using microbial enzymes, we will analyze the synthetic activity expressed by various enzymes under artificially controlled conditions, the conversion activity that is exhibited against non-naturally synthetic compounds, or the multifunctional effects involved in the metabolism of amino acids, nucleotides, vitamins, etc., and establish the basis for industrial production of various通过增加这些酶的滴度来有用。此外，目的是开发一个原始的生产领域，该领域结合了精致的酶功能，该酶功能与精确合成方法创建手性有机化合物。今年的研究结果如下：（1）使用甲醇赋予的细菌酶合成丝氨酸的反应条件和参与合成的酶的酶被纯化以阐明其特性。（2）克隆成熟细菌的热释放脱氢酶基因，分析结构基因，并研究了酶的主要结构。（3）研究了羧肽酶y和p合成二肽的反应条件和机制。（4）通过脂肪和脂肪与微生物脂肪酶的甘油反应，新的脂肪组成的合成成功。此外，使用微生物磷脂酶D.（5）使用具有各种生理活性的γ-谷氨酰胺牛磺酸的合成来建立纯纯度的磷脂酰胆碱的过程，该过程是使用各种生理活性进行的。（6）我们研究了Govinamide（FB）的微生物活性，Govinamide（FB）是甲烷菌细菌分泌的腺类腺苷的主要成分，并将FB进一步转化为B-12。（7）酯酶用于合成生理活性物质的合成中间体，1β-甲基碳青霉烯，维生素D相关物质和抗肿瘤抗生素lyzoxin。（8）使用酵母和酯酶合成的抗生素丙酮酸甲酯，霉菌AO1等。（9）开发了一种基于螯合物形成的蛋白质的方法，并基于此原理，将修饰的手推车固定到赖氨酸 - 塞法德克斯。