誘電泳動を利用する細胞の表現型別識別と分離

使用介电泳进行细胞表型鉴定和分离

基本信息

批准号：
20034050
负责人：
安川智之
金额：
$ 1.98万
依托单位：
University of Hyogo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は,「誘電泳動を利用する細胞操作技術の電気回転現象への応用」により細胞を大量・一括・迅速に制御・回転させ細胞膜表面の受容体の発現量と表現型(フェノタイプ)を解析する手法を確立し,さらに,解析・識別した細胞を分離,捕捉および回収できる簡便なシステムの構築にある.抗CD33抗体を固定化した交互くし型マイクロアレイ電極と平板ガラス基板を厚さ30μmのスペーサを介して挟み込みマイクロ流路構造を有する誘電泳動デバイスを作製した.この流路内に膜表面にCD33抗原が発現している白血球株であるHL-60細胞の懸濁液を導入し,正の誘電泳動により細胞を抗体固定化電極上に配列させた.交流電圧の周波数を変化させ負の誘電泳動を作用させたところ,一部の細胞は電極アレイから電極-電極間に移動したが,ほとんどの細胞がアレイ電極上に捕捉され配列状態を維持した.しかし,CD33抗原を発現していない白血球細胞株であるCCRF-CEM細胞を用いて電極上に配列させたところ,ほとんどの細胞が捕捉されず電極-電極間に移動した.また,電極表面上に固定化する抗体をCD33に特異性を持たない抗マウスIgG抗体を固定化した場合には,HL-60およびCCRF-CEM細胞ともに捕捉されなかった.これは,細胞膜表面上のCD33と電極上に固定化した抗体間で免疫反応が進行したためである.誘電泳動による細胞の配列は約10秒程度で可能であり,トータル3分程度で膜タンパク質を発現している白血球細胞を識別できる.システムを確立するために,細胞の濃度,溶媒の導電率,交流電圧および周波数についても詳細な最滴化を行った.

这项研究的目的是“将利用介电电泳的细胞操纵技术应用于电旋转现象”，以快速、大量、批量地控制和旋转细胞，并改变细胞膜上受体的表达水平和表型（phenotype）表面），并构建一个可以分离、捕获和回收分析和识别的细胞的简单系统。我们制作了一个介电泳装置，其微通道结构夹在30微米厚的垫片中。将HL-60细胞悬浮液（一种在膜表面表达CD33抗原的白细胞株）置于该通道中。当改变交流电压的频率以诱导负介电电泳时，一些细胞从电极之间的电极阵列上分离。然而，当将不表达CD33抗原的白细胞系CCRF-CEM细胞排列在电极上时，大多数细胞被捕获在阵列电极上并保持排列状态的HL-60和CCRF-。这是因为细胞膜表面的 CD33 和固定在电极上的抗体之间进行的免疫反应可以在约 10 秒内完成，从而可以识别表达膜蛋白的白细胞。总共约3分钟。为了建立系统，对细胞浓度、溶剂电导率、交流电压和频率进行了详细优化。

项目成果

期刊论文数量（49）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Negative dielectrophoretic manipulation with microparticles for rapid inununosensing

使用微粒进行负介电泳操作以实现快速无声传感

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
T. Yasukawa;et.al.
通讯作者：
et.al.

基礎から材料への展開第3節第15章超分子電

从基础到材料的发展第三节第十五章超分子电

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
影响因子：
0
作者：
安川智之;水谷文雄
通讯作者：
水谷文雄

Enzyme Immunoassay for Insulin Using Highly-Sensitive Hydrogen Peroxide Sensors Based on Charge Accumulation Systems

使用基于电荷累积系统的高灵敏度过氧化氢传感器对胰岛素进行酶免疫分析

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
T. Yasukawa;et.al.
通讯作者：
et.al.

Rapid Fabrication of Nanoparticles Array on Polycarbonate Membrane Based on Positive Dielectronhoresis

基于正介电电泳的聚碳酸酯膜上纳米粒子阵列的快速制备

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
Sensors and Actuators B : Chemical 131
影响因子：
0
作者：
Hyun Jung Lee;et.al.
通讯作者：
et.al.

誘電泳動を用いた高感度迅速ELISAシステム

使用介电泳的高灵敏度和快速 ELISA 系统

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
影响因子：
0
作者：
安川智之;ら
通讯作者：
ら

DOI：
{{ item.doi }}
发表时间：
{{ item.publish_year }}
期刊：
{{ item.journal_name }}
影响因子：
{{ item.factor }}
作者：
{{ item.authors }}
通讯作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ monograph.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ sciAawards.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ conferencePapers.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ patent.updateTime }}

安川智之其他文献

三次元グリッド電極を用いた細胞膜容量の一括計測

使用三维网格电极批量测量细胞膜电容

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
河合志希保;有本聡;是永継博;鈴木雅登;安川智之
通讯作者：
安川智之

超分子太陽電池の創製

超分子太阳能电池的创建

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
Jin;L.;Suzuki;K.;安川智之;羽曾部卓
通讯作者：
羽曾部卓

誘電泳動を用いる細胞アレイの作製とバイオセンサーへの応用

使用介电泳制造细胞阵列及其在生物传感器中的应用

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
A.Hiraga;N.Morrice;E.Honda;S.Tamura;H.Munakata;Hitoshi Shiku et al.;小林孝安;Sang Hyun Lee et al.;Shigenobu Kasai et al.;天野一宇;Takeshi Saito et al.;逸見健明;Yasufumi Takahashi et al.;逸見健明;安川智之;齊藤聡子;田村眞理;安川智之;齊藤聡子;安川智之;Tomoyuki Yasukawa;Tomoyuki Yasukawa;安川智之;安川智之;安川智之
通讯作者：
安川智之