プロテアソーム構造変換を媒介とする細胞サイズ制御機構の解明

阐明蛋白酶体结构转化介导的细胞大小控制机制

• 批准号: 19039001
• 负责人: 山口 淳二
• 金额: $ 2.69万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19039001/
• 关键词: 環境; 細胞・組織; 植物; 蛋白質; バイオマス

植物では, 細胞周期にはじまり器官の形態形成といった様々な段階の生命事象が, 特定の標的タンパク質を能動的に分解することにより直接的に制御されている。高等植物には, このタンパク質分解の実質を担うユビキチン・26Sプロテアソーム系に関与する遺伝子群がゲノム全遺伝子の5%以上(約1,300遺伝子)も存在しており, 他の生物種と比較しても類をみないほど多い。これはゲノムワイドでみた高等植物の特徴の一つである。この事実は,植物がもつ優れた環境適応能力は, 上述のタンパク質の分解系を媒介とした環境シグナル制御系が一翼を担うとする仮説を裏付けるものである。今年度は, プロテアソームと機能性RNA形成機構との関係を中心に研究を進めた。シロイヌナズナ19Sプロテアソームのサブユニットにおいて, RPT2bとRPT5aの2重欠損変異体では, 発育不全とともに, 緑葉がカールした。これは, 既報のhasty変異体と類似している。HASTYはエクスポーチン5遺伝子をコードし, pre-microRNAの核外排出に関与する。2重変異体を用いて詳細な解析を実施したところ, この変異体でもmiRNAの蓄積, 標的遺伝子の転写抑制の解除, 並びにpri-miRNAの蓄積が観察された。これらの結果から, この2重変異体では, miRNA形成に異常があることが明かとなった。現在, この現象の分子標的の探索を実施している。また, 環境変化によるプロテアソームサブユニット変換の検証を目的に、FLAG標識プロテアソーム導入シロイヌナズナの作成, FALG抗体によるプロテアソーム精製, 2D-PAGEによる各サブユニットの分離・タンパク定量, MS解析による同定を実施した。

在植物中，在各个阶段的生命事件，例如细胞周期和器官形态发生，直接通过主动降解特定靶蛋白来控制。在较高的植物中，泛素-26S蛋白酶体系统中涉及的总基因中有超过5％（约1,300个基因），该系统负责该蛋白水解的实质，并且与其他物种相比是无与伦比的。这是全基因组中较高植物的特征之一。这一事实支持以下假设：植物的优秀环境适应能力是由蛋白质降解系统介导的上述环境信号调节系统。今年，我们进行了研究，重点是蛋白酶体与功能性RNA形成机理之间的关系。在拟南芥19S蛋白酶体亚基中，绿叶与RPT2B和RPT5a的双缺陷突变体中的生长特技一起卷曲。这类似于先前报道的仓促突变体。 Hasty编码Exportin 5基因，并参与微米先前的核排泄。使用双重突变体进行了详细的分析，在该突变体中也观察到了miRNA的积累，靶基因的转录抑制作用以及PRI-MIRNA的积累。这些结果表明，该双突变体中miRNA形成异常。目前，我们正在为此现象进行搜索分子靶标。此外，为了验证由于环境变化而验证蛋白酶体亚基的转化，我们进行了拟南芥，标记标记的蛋白酶体引入的拟南芥，蛋白酶体纯化，falg抗体，falg抗体，分离和蛋白质通过2D-PAGE确定，并通过2D-PAGE和识别MS分析。

项目成果

REGULATION OF LEAF ORGAN SIZE BY THE Arabidopsis RPT2a AND RPT5a 19S PROTEASOME SUBUNIT

拟南芥RPT2a和RPT5a 19S蛋白酶体亚基对叶器官大小的调节

• 发表时间: 2008
• 作者: Tsutsui T;Kato W;佐古香織;佐古香織;佐古香織;Taori Sako;佐古香織;Kaori Sako
• 通讯作者: Kaori Sako

植物プロテアソームの機能-19S複合体を中心として

植物蛋白酶体功能——聚焦19S复合体

• 发表时间: 2007
• 期刊: 植物の成長調節 42
• 作者: Fukuda;H.;福田裕穂;福田裕穂(共著);Tojo T;佐藤長緒;Tsutsui T;Yao S-G;池田亮;Sonoda Yutaka;Mitsunaga Shinichiro;佐古香織
• 通讯作者: 佐古香織

シロイヌナズナにおけるC/N制御E3リガーゼSSV1・ATL6は病原体抵抗機構にも関与する

拟南芥中 C/N 调节的 E3 连接酶 SSV1 和 ATL6 也参与病原体抗性机制

• 发表时间: 2009
• 作者: Kamiya;H.;Fukunaga;S.;Ohyama;T. and Harash ima;H.;佐藤長緒;Tsutsui T;小平玲菜;Yao S-G;西村恵美;大山隆;池田亮;Sonoda Yutaka;木村元;Mitsunaga Shinichiro;古屋美香;佐古香織;浅野士郎;佐藤長緒;宇田川紘司;前川修吾
• 通讯作者: 前川修吾

環境ストレス応答における植物プロテアソーム構造・機能変換の解析

植物蛋白酶体响应环境胁迫的结构和功能转变分析

• 发表时间: 2009
• 作者: Kamiya;H.;Fukunaga;S.;Ohyama;T. and Harash ima;H.;佐藤長緒;Tsutsui T;小平玲菜;Yao S-G;西村恵美;大山隆;池田亮;Sonoda Yutaka;木村元;Mitsunaga Shinichiro;古屋美香;佐古香織;浅野士郎;佐藤長緒
• 通讯作者: 佐藤長緒

Arabidopsis MBFls control Leaf Cell Cycle and its expansion

拟南芥 MBFls 控制叶细胞周期及其扩增

• 发表时间: 2009
• 期刊: Plant and Cell Physiology 50
• 作者: Fukuda;H.;福田裕穂;福田裕穂(共著);Tojo T
• 通讯作者: Tojo T