ガングリオシドGM3合成酵素遺伝子診断による非小細胞肺癌の抗癌剤感受性の予測

神经节苷脂GM3合酶基因诊断预测非小细胞肺癌抗癌药物敏感性

基本信息

批准号：
18014001
负责人：
井ノ口仁一
金额：
$ 7.81万
依托单位：
Tohoku Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでに当研究室においてSAT-I mRNA発現量とEGFRチロシンキナーゼ阻害剤感受性が負の相関性を示すことが明らかとなった。そこでSAT-I高発現モデル細胞を用いて作用機序の解明を試みた。以前の報告で樹立したマウスGM3再構成肺癌細胞J5/SAT-Iを用いて、EGFRにおけるシグナルについて検討を行った。はじめに、EGFR発現量をウェスタンブロット法により確認したところ、GM3再構成細胞では蛋白質発現量が増加していた。一方で、EGFR mRNA発現量には顕著な差が認められなかったことから、GM3再構成細胞ではEGFRは蛋白質レベルで発現量が亢進していることが示唆された。また、ゲフィチニブ24時間処理における感受性試験を行った結果、GM3再構成細胞ではゲフィチニブに対する感受性が亢進していることが明らかとなった。そこで、GM3再構成細胞におけるゲフィチニブ感受性亢進機序を明らかにするため、EGFRの自己リン酸化について検討した。EGF刺激により、GM3再構成細胞ではMockと比較してEGFRが強くリン酸化されていた。また、ゲフィチニブ処理におけるEGFRのリン酸化を検討した結果、GM3再構成細胞ではMockと比較して強く抑制されていることが明らかとなった。以上の結果から、GM3再構成細胞ではEGFRを介するシグナル伝達経路への依存度が高く、ゲフィチニブによるEGFRシグナル経路の特異的遮断により、感受性が亢進している可能性が考えられた。(Cancer Science 2007)現在、SAT-I mRNA発現量の高い患者におけるゲフィチニブの奏効率を検証するため、札幌医科大学第3内科および外科において広範に臨床成績を検討中である。

有人揭示了SAT-I mRNA表达水平和对EGFR酪氨酸激酶抑制剂的敏感性在我们的实验室中呈负相关。因此，我们尝试使用高表达SAT-I细胞阐明作用机理。使用小鼠GM3重新确定的肺癌细胞J5/SAT-I研究了EGFR中的信号，这是在先前的报告中建立的。首先，当通过蛋白质印迹确认EGFR表达水平时，GM3重新构成的细胞中蛋白质表达水平增加。另一方面，在EGFR mRNA表达的量中没有观察到显着差异，这表明在GM3重新确定的细胞中，EGFR在蛋白质水平上升高。此外，在吉非替尼治疗期间进行了24小时的敏感性测试，据显示，GM3回收的细胞更容易受到吉非替尼的影响。因此，我们研究了EGFR的自磷酸化，以阐明在GM3重新建立的细胞中增加对吉非替尼的敏感性的机制。与模拟相比，EGF刺激使EGFR在GM3恢复的细胞中强烈磷酸化。此外，在检查吉非替尼治疗期间EGFR的磷酸化时，发现与模拟相比，GM3重新构成的细胞受到了强烈抑制。从以上结果来看，GM3重新确定的细胞可能对EGFR介导的信号通路具有很高的依赖性，并且由于Gefitinib对EGFR信号通路的特异性阻断，敏感性可能会提高。（Cancer Science 2007）目前，为了验证高SAT-I mRNA表达水平的患者Gefitinib的缓解率，目前正在萨波罗医科大学的第三个内科和手术部门检查临床结果。