DNA損傷修復遺伝子異常とアポトーシス制御機構

DNA损伤修复基因异常及细胞凋亡调控机制

基本信息

批准号：
17013015
负责人：
田内広
金额：
$ 2.43万
依托单位：
Ibaraki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

発がんの引き金となる遺伝的不安定性の発生機構を探るために、高発がんリスクと放射線高感受性を呈する遺伝病、ナイミーヘン症候群(NBS)の原因遺伝子NBS1に着目し、我々がニワトリ細胞で見いだしたNBS1がp53とは独立にアポトーシスを制御するという新たな事象のメカニズムを解明してNBS1がどのようにして発がん抑制に関与しているのかを明らかにすることを目的として研究を行っている。NBS患者細胞由来細胞および患者細胞にNBS1を導入した相補細胞を用いて放射線によって誘発されるアポトーシスを解析した結果、NBS1患者細胞ではDNA損傷で起きるアポトーシスが著しく抑制され、その抑制の程度はATM機能欠損である毛細血管拡張性運動失調症(AT)細胞よりも強かったことから、ヒト細胞においてNBS1がATM-p53経路とは異なる経路を通じたDNA損傷誘発アポトーシスに関与していることが示唆された。次に、このp53-independentなアポトーシス経路解明の糸口をつかむため、NBS患者細胞およびNBS1相補細胞においてDNA二重鎖切断応答に関連したアポトーシス誘導シグナルタンパクのDNA損傷に対する応答についてウエスタンブロットおよび免疫染色を用いて解析した。その結果、DNA二重鎖切断に応答したアポトーシス誘導シグナルの初期過程のみならず、アポトーシス発動の終盤においてもNBS1が何らかの制御をかけていることを示唆するデータが得られ、発がん抑制におけるNBS1の多機能性を解明する足がかりが得られた。今後この成果をもとにより詳細な解析をおこなう予定である。

为了探索引发癌症的遗传不稳定性的机制，我们重点关注导致尼米亨综合征 (NBS) 的基因 NBS1，这是一种表现出高癌症风险和高辐射敏感性的遗传疾病。我们正在进行研究以阐明其机制。 NBS1 独立于 p53 控制细胞凋亡的新事件，并阐明 NBS1 如何参与抑制癌发生。使用NBS患者细胞来源的细胞和转染NBS1的互补细胞对辐射诱导的细胞凋亡进行分析，结果发现NBS1患者细胞中由DNA损伤引起的细胞凋亡被显着抑制，并且这种抑制的程度由ATM功能决定这比有缺陷的共济失调毛细血管扩张 (AT) 细胞更强，表明 NBS1 通过与人类细胞中的 ATM-p53 途径不同的途径参与 DNA 损伤诱导的细胞凋亡。接下来，为了获得阐明这种不依赖于 p53 的凋亡途径的线索，我们进行了蛋白质印迹和免疫染色来检查 NBS 患者细胞和 NBS1 中与 DNA 双链断裂反应相关的凋亡诱导信号蛋白的反应。 -使用互补细胞进行分析。结果，我们获得的数据表明NBS1不仅在响应DNA双链断裂的细胞凋亡诱导信号的初始过程中发挥一定的控制作用，而且在细胞凋亡启动的最后阶段也发挥着一定的控制作用，并表明NBS1发挥着一定的作用。这为我们阐明其功能奠定了基础。我们计划将来根据这些结果进行更详细的分析。