眼発生システムにおける線維芽細胞増殖因子19の役割の解明

阐明成纤维细胞生长因子 19 在眼睛发育系统中的作用

基本信息

批准号：
16027238
负责人：
大内淑代
金额：
$ 3.84万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、細胞間シグナル分子の1つである線維芽細胞増殖因子19(FGF19)に焦点をあて、眼発生システムにおける本遺伝子の役割を解明することで、器官形成および再生過程の基盤となる細胞分化制御のしくみを明らかにすることを研究目的とした。FGF19は,ニワトリ眼発生においてレンズ形成,神経網膜形成、網膜細胞分化にともなってダイナミックな発現パターンを示す。Fgf19遺伝子の機能解析を行なうために,CAGGSプロモータ発現コンストラクトをin ovo電気穿孔法によりニワトリ眼胞に発現させたが,レンズ発生分化に関与するL-maf,Prox1,delta-crystallinの発現パターンに明らかな変化は観察されなかった。そこで,FGF19のレセプターの1つであるFGFレセプター4の細胞外領域のみの発現コンストラクトを用いて,FGF19シグナルの阻害を試みたところ,L-mafの発現が誘導された。また,L-mafの過剰発現によりFgf19とProx1の発現が誘導され,Fgf8の過剰発現によりL-mafとFgf19の発現が誘導されることを見出した。従って、FGF19-FGFR4シグナルはFGF8シグナルの制御下にL-maf発現のnegative feedback機構に関与している可能性が示唆された。Fgf19の特異的機能阻害を行なうために,ニワトリ胚眼胚におけるin ovo electroporation RNA干渉法(RNAi)を試みたが,現在のところ明らかな、RNAi効果は観察されていない。Fgf19の発現する水平細胞の後期分化マーカの候補としてメラノプシンに着目し,ニワトリホモログの単離と発現パターンの解析を行なった。メラノプシンは概日リズムの光同調や瞳孔反射の光受容に関与するオプシンタンパク質であるが,孵卵10日ニワトリ胚において既に網膜,前脳,甲状腺に発現すること,網膜では,発生途上の水平細胞に発現し,神経節細胞のある集団や双極細胞にも一過性に発現することがわかった。

这项研究的重点是细胞间信号分子之一的成纤维细胞生长因子19（FGF19），旨在阐明细胞分化控制的机制，该机制是通过阐明该基因在眼睛发育系统中的作用来形成器官发生和再生过程的基础。 FGF19在鸡眼发育中表现出动态表达模式，以及镜头形成，神经视网膜形成和视网膜细胞分化。为了对FGF19基因进行功能分析，CAGGS启动子表达构建体在OVO电穿孔中在鸡眼眼睑中表达，但是在L-MAF，Prox1和Delta-晶体的表达模式中未观察到明显的变化，这些变化涉及与透镜生成分化有关。因此，我们尝试使用仅在FGF受体4的细胞外区域（FGF19的受体之一）和诱导的L-MAF表达的FGF受体4中抑制FGF19信号。还发现L-MAF的过表达诱导FGF19和Prox1的表达，而FGF8的过表达诱导L-MAF和FGF19的表达。因此，建议在FGF8信号控制下L-MAF表达的负反馈机制可能与FGF19-FGFR4信号有关。为了执行对FGF19功能的特定抑制作用，在OVO电穿孔RNA干扰法（RNAi）中尝试在鸡肉胚胎眼胚中尝试，但目前尚未观察到RNAi效应。我们专注于黑色素蛋白作为表达FGF19的水平细胞的晚分化的候选标记，并分析了鸡同源物的表达模式。黑色素蛋白是一种蛋白蛋白，参与昼夜节律的光调节和瞳孔反射的光感受，但发现它在视网膜，前脑和甲状腺胚胎中表达了10天，在视网膜中，在视网膜中，它在开发细胞中在水平的细胞中表达，并在biplion and biplion and biplion and biplion and biplion and biplion中表达。

项目成果

期刊论文数量（10）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

線維芽細胞増殖因子FGF10は組織の修復・再生にも関与する

成纤维细胞生长因子 FGF10 也参与组织修复和再生

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
化学と生物 1
影响因子：
0
作者：
西方敬人;真壁和裕;Tomonari et al.;Kurose et al.;大内淑代;大内淑代;大内淑代
通讯作者：
大内淑代

バイオ実験プロトコール細胞組織の形態観察と解析のテクノロジー第3回全遺伝子の発現を組織切片で観察するテクノロジー

生物实验方案细胞组织形态观察分析技术第 3 部分组织切片所有基因表达观察技术

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
バイオテクノロジージャーナル 5
影响因子：
0
作者：
西方敬人;真壁和裕;Tomonari et al.;Kurose et al.;大内淑代
通讯作者：
大内淑代

蛋白質核酸酵素増刊号発生システムのダイナミズム(上野直人, 野地澄晴, 八杉貞雄編)『網膜発生分化の分子機構』

蛋白质核酸酶特刊发育系统的动态（上野直人、野地纯晴、安来贞男主编）《视网膜发育分化的分子机制》

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
影响因子：
0
作者：
西方敬人;真壁和裕;Tomonari et al.;Kurose et al.;大内淑代;大内淑代;大内淑代;Entesarian M et al.;Kurose H et al.;Kurose H et al.;大内淑代(分担執筆)
通讯作者：
大内淑代(分担執筆)

光受容細胞の発生進化の謎にせまる光同調をつかさどるメラノプシン.フラクションコレクター

接近感光细胞发育和进化的奥秘：黑视蛋白，负责光夹带收集。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
蛋白質核酸酵素 50
影响因子：
0
作者：
西方敬人;真壁和裕;Tomonari et al.;Kurose et al.;大内淑代;大内淑代
通讯作者：
大内淑代

Expression of Fibroblast growth factor 19 (Fgfl9) during chicken embryogenesis and eye development, compared with Fgf15 expression in the mouse.

鸡胚胎发生和眼睛发育过程中成纤维细胞生长因子 19 (Fgfl9) 的表达，与小鼠中 Fgf15 的表达进行比较。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Gene Expression Patterns 4・6
影响因子：
0
作者：
西方敬人;真壁和裕;Tomonari et al.;Kurose et al.;大内淑代;大内淑代;大内淑代;Entesarian M et al.;Kurose H et al.;Kurose H et al.
通讯作者：
Kurose H et al.