オーキシン情報伝達系の分子機構研究

生长素信号系统分子机制研究

基本信息

批准号：
14036201
负责人：
山本興太朗
金额：
$ 71.23万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

MSG2タンパク質を検出するために、ルシフェラーゼ融合タンパク質として検出することを試みた。その結果、シロイヌナズナ黄化芽生えでのMSG2 promoter (pMSG2)::MSG2::LUC活性は、pMSG2::LUCの1/10程度だった。この差がMSG2タンパク質にかかる分解調節だと考えられる。このMSG2::LUC活性はプロモーター活性同様、オーキシン処理によって早期に増加した。明所で栽培した芽生えでは、プラシノステロイドによってMSG2のメッセージが増加することが報告されているが、MSG2::LUCを用いて調べたところ、MSG2タンパク質レベルも同様に増加することが分かった。Aux/IAAとARFとの相互作用を物理的な蛍光相関分光法(fluorescence correlation spectroscopy)を用いて測定した。Aux/IAAとしては、MSG2とAXR2とSLR、 ARFのタンパク質問相互作用ドメインとしてはNPH4/ARF7とMP/ARF5のドメインIIIとドメインIV(CTD)を選んで、両者をHeLa細胞に一過的に発現させ、蛍光強度の相関係数を測定した。その結果、Aux/IAAとARF-CTDの相互作用は強く、両者はほぼ100%結合すること、一方Aux/IAA同士、またはARF-CTD同士の結合は比較的弱く、この場合は20%程度しか結合していないことが分かった。このことは、Aux/IAAレベルの小さい変動でもARFの結合状態を変化させうることを示唆している。

为了检测MSG2蛋白，我们尝试将其检测为荧光素酶融合蛋白。结果，拟南芥黄化幼苗中的MSG2启动子(pMSG2)::MSG2::LUC活性约为pMSG2::LUC的1/10。这种差异被认为是MSG2蛋白降解的调节。这种 MSG2::LUC 活性与启动子活性一样，在生长素处理的早期就增加了。据报道，Prasinosteroid 可以增加光生长幼苗中的 MSG2 信息，当使用 MSG2::LUC 检查时，我们发现 MSG2 蛋白水平也同样增加。使用物理荧光相关光谱法测量 Aux/IAA 和 ARF 之间的相互作用。选择MSG2、AXR2和SLR作为Aux/IAA，选择NPH4/ARF7和MP/ARF5的结构域III和结构域IV(CTD)作为ARF的蛋白相互作用结构域，并将两者瞬时导入HeLa细胞中表达。并测定荧光强度的相关系数。结果，Aux/IAA 和 ARF-CTD 之间的相互作用很强，两者之间几乎 100% 结合，而 Aux/IAA 和 ARF-CTD 之间的结合相对较弱，在这种情况下只有约 20%。结果发现没有连接。这表明即使 Aux/IAA 水平的微小变化也可以改变 ARF 的结合状态。

项目成果

期刊论文数量（16）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Disruption and overexpression of auxin response factor 8 gene of Arabidopsis affect hypocotyl elongation and root growth habit, indicating its possible involvement in auxin homeostasis in light condition.

DOI：
10.1111/j.1365-313x.2004.02220.x
发表时间：
2004-11
期刊：
The Plant journal : for cell and molecular biology
影响因子：
0
作者：
C. Tian;Hideki Muto;Kanako Higuchi;T. Matamura;K. Tatematsu;T. Koshiba;Kotaro T. Yamamoto
通讯作者：
C. Tian;Hideki Muto;Kanako Higuchi;T. Matamura;K. Tatematsu;T. Koshiba;Kotaro T. Yamamoto

Isolation of a mutant of Ferl gene, acting synergistically with the ARF8 gene to control development of the anther and filament in Arabidopsis.

Ferl 基因突变体的分离，与 ARF8 基因协同作用，控制拟南芥花药和花丝的发育。