視蓋の誘導・位置特異性決定の分子機構

视顶盖引导和位置特异性确定的分子机制

基本信息

批准号：
10220201
负责人：
仲村春和
金额：
$ 55.36万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

1.これまで、ニワトリ胚での遺伝子発現阻害実験は困難であったが、標的遺伝子とマッチする21ベースのヘアピン型RNA発現ベクターをエレクトロポレーションにより導入することによって可能となった。現在、この方法を用いて視蓋の領域形成のさらなる解析を行っている。2.中脳胞領域でEnによりその発現が抑制される遺伝子のスクリーニングの過程でcHes5が単離された。,cHes5は中脳胞前側で強く発現しており、En2の発現の強い峡部ではその発現が見られない。実際En2によりcHes5の発現は抑制された。またEn2に対するsiRNAを導入し、En2の発現を抑制すると、峡部でcHes5の発現が誘導されたことから、cHes5は視蓋の極性形成に関与している可能性が示唆された。3.同じくEnにより発現が抑制される遺伝子としてb2-chimerinが単離された。これも中脳胞領域で興味深い発現をしているので現在機能解析を続けている。4.ゼブラフィシュでislet3によりその発現が制御され、峡部オーガナイザー活性と関係のある分子としてcanopyファミリーが同定された。ニワトリ胚のCanopy遺伝子の単離を試み、canopy2が得られた。Canpy2は中脳胞前域をカバーするように発現していることから、エレクトロポレーションにより現在その解析を進めている。6年間の研究期間を通じて、中脳、後脳の領域形成のメカニズムの理解が深まったが、3,4のようにこれからの課題もできたのでさらに研究を展開していく心づもりである。

1。到目前为止，很难与鸡胚胎进行基因表达抑制实验，但通过引入21个基于21个基于电穿孔靶基因的RNA型RNA RNA表达矢量来实现。当前，该方法用于进一步分析视图盖的区域形成。 2。CHES5在筛选基因中被中性区域抑制EN抑制的基因。，Ches5在中间座的前面强烈表达，并且在EN2具有强烈表达的峡谷中看不到它的表达。实际上，CHES5的表达被EN2抑制。此外，将siRNA引入EN2并抑制EN2的表达表明CHES5可能参与了视图盖的杆形成，因为Ches5的表达在峡谷中诱导。 3。B2-奇氏蛋白也被分离为一个基因，其中表达被EN抑制。这也是中部区域中有趣的表达，因此目前正在继续进行功能分析。 4。在斑马鱼中的Islet3控制该表达，冠层家族被鉴定为与组织者活性相关的分子。 Canopy2是通过用鸡胚的冠层基因尝试工具获得的。由于Canpy2表示为覆盖中脑细胞，因此目前正在通过电穿孔分析该分析。在整个六年的研究期间，区域和后大脑形成的机制得到了加深，但是与3,4一样，我们已经能够进一步发展研究。