分泌蛋白質AN34ファミリーのショウジョウバエ神経系形成における役割

分泌蛋白AN34家族在果蝇神经系统形成中的作用

基本信息

批准号：
07262223
负责人：
能瀬聡直
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07262223/
关键词：
神経-筋結合神経認識 AN34 筋肉 F-spondin 分泌蛋白質神経特異結合運動神経

项目摘要

われわれは比較的構成が単純なショウジョウバエの神経系をモデルとして、神経回路網形成の分子機構を解析している。昨年度計画において、脊椎動物のF-spondinに相同性をもつ分子AN34のクローニングについて報告した。脊椎動物のF-spondinは、floor plateで特異的に発現する分泌蛋白質である。一方AN34は、少数の筋肉及び神経細胞において特異的に発現している。AN34/F-spondinファミリーは、その神経系内における特異的な発現様式、F-spondinについて示されているin vitroにおける神経繊維伸長能などから、脊椎動物、無脊椎動物を通じ、神経繊維誘導に基本的な役割を果たしていることが期待された。本年度計画においては、この新しい遺伝子ファミリーのショウジョウバエ神経系形成における役割を調べるため以下の研究を行った。(1)AN34欠失変異体の単離および解析AN34転写開始点近傍にP因子が挿入した株、P〔AN34〕から、imprecise excision法を用い、AN34遺伝子領域を欠失した変異体を得た。様々なマーカーを用い、ホモ胚において筋肉、神経系形成に異常がないかを調べた。特にAN34を発現する筋肉18番の形成および運動神経の投射に着目した。しかし、いずれの場合も異常は見出されなかった(2)AN34/F-spondin familyに属する新しい分子の構造および発現様式AN34、F-spondin間の相同領域に対するプライマーを用いPCRを行い、このファミリーに属する新たな遺伝子を2つ(♯3、♯8)クローニングし、その全構造を決定した。♯3、♯8の発現様式をRNA in situにより調べた。その結果♯3は一部のhemocyteにおいて、♯8は中枢神経系のニューロパイルに沿って存在する特定のグリア細胞において発現していることが分かった。

我们使用果蝇神经系统的相对简单结构分析了神经网络形成的分子机制。在上一个财政年度的计划中，我们报告了分子AN34的克隆，这与脊椎动物F-Spondin是同源性的。脊椎动物F-绞痛是一种分泌蛋白，专门在地板板上表达。另一方面，AN34在少数肌肉和神经元中特别表达。预计AN34/F-Spondin家族将由于其在神经系统中的特定表达模式以及为F-Spondin显示的体外神经纤维扩展能力，在通过脊椎动物和无脊椎动物通过脊椎动物和无脊椎动物诱导神经纤维中发挥基本作用。在今年的计划中，进行了以下研究，以研究这种新基因在果蝇神经系统形成中的作用。（1）从菌株P（AN34）中对AN34缺失突变体的分离和分析，在该菌株p（AN34）中，在AN34转录起始点附近插入了因子P，使用Sumpanise Concision方法获得了带有AN34基因区域的突变体。各种标记被用于检查同型胚胎的肌肉和神经系统形成异常。我们特别关注表达AN34的18号肌肉的形成和运动神经的投影。但是，在任何一种情况下，均未发现属于AN34/F-Spondin家族的新分子的结构和表达模式，使用引物使用引物在AN34和F-Spondin之间的同源区域进行，并确定了两个属于该家族的新基因（＃3，＃8），并确定了整个结构。 RNA原位检查了＃3和＃8的表达模式。结果表明，＃3在某些血细胞中表达，＃8在存在的特定神经胶质细胞中表达，沿着中枢神经系统的神经膜片。