L-バンドESRによる肺内還元機構の解析

L波段ESR肺内复位机制分析

基本信息

批准号：
06271259
负责人：
竹下啓蔵
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

大気汚染物質からの制御機構のうち肺における還元機構を動物が生きているときに近い状態で探った。ニトロキシルラジカルは還元を受けると電子スピン共鳴(ESR)シグナルを失うため、生体内レドックス反応のプローブとして有用である。また、L-バンドESRは実験動物に注入したニトロキシルラジカルのwhole body測定が可能である。そこで、ニトロキシルラジカルの水溶液をマウス肺に注入し、そのシグナル消失速度をL-バンドESRにより測定して肺内の還元機構を解析した。1.置換基を変え、疎水性の程度の異なるニトロキシルラジカルの還元速度の違いを調べたところ、n-オクタノール/水分配係数が大きなニトロキシルほど速く還元された。疎水性の高い物質は膜に溶け込みやすいことから、還元は肺実質細胞の膜内で起こることが示唆された。2.膜透過性SH-修飾試薬であるN-エチルマレイミドをニトロキシルと同時に肺内に注入するとニトロキシルの還元が強く阻害され、本還元反応へのSHの関与が示唆された。膜非透過性のSH修飾試薬やマレイミド基が膜内に位置する脂肪酸のマイレミド誘導体を用いたところ、還元はマレイミド基が膜面から約1nmのものにより効果的に阻害された。この事から膜の疎水領域に存在するSH基が還元反応に係わっていることが示唆された。3.ニトロキシルラジカルの還元初速度の初濃度依存性から、本還元反応がミカエリスーメンテン様の反応であることが示唆された。今後、還元反応を速度論的に解析することにより反応メカニズムを詳細に解明する予定である。

在空气污染物的控制机制中，研究了与动物活着时相似的状态研究肺部的还原机制。硝氧基自由基可作为体内氧化还原反应的探针，因为它们在还原后会失去电子自旋共振（ESR）信号。此外，L波段ESR可以测量注入实验动物的硝基自由基的整个体。因此，将硝化自由基水溶液注入小鼠肺中，并通过L波段ESR测量信号消失率，以分析肺中的还原机制。 1。当我们研究不同程度的疏水性取代基的硝氧基自由基的降低率差时，硝基氧基的硝基氧基较大，较大的N-辛醇/水分分区系数降低了速度。高度疏水性物质倾向于溶于膜，表明还原发生在肺实质细胞的膜内。 2。将N-乙基马来酰亚胺（一种可渗透膜的SH修饰试剂）同时与硝氧基注射到肺中，强烈抑制了硝化的还原，这表明SH参与了这种还原反应。当使用脂肪酸的脂肪酸的膜变化试剂和mylemido衍生物中，其中马来酰亚胺基在膜内时，从膜表面的大约1 nm组的米斯米多组有效地抑制了还原。这表明膜的疏水区中存在的SH组参与还原反应。 3。硝化自由基初始还原速率的初始浓度依赖性表明，这种还原反应是迈克尔斯 - 市政样反应。将来，我们计划通过对还原反应的动力学分析来详细阐明反应机制。