眼組織における有機アニオントランスポーターの発現と機能の解析

眼组织有机阴离子转运蛋白的表达及功能分析

基本信息

批准号：
14571654
负责人：
山口克宏
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

ナトリウム非依存性有機アニオントランスポーター(organic anion transporter)は、甲状腺ホルモン、ステロイド、プロスタグランディンなどと結合し、細胞間の薬物移行に関与する重要な機能を有する構造蛋白であり、ラットの有機アニオントランスポーター遺伝子として、oatp1、oatp2、oatp3が知られている。今回、我々が行ったin situ hybrydizationでは、oatp2のシグナルを網膜色素上皮(RPE)と内顆粒層の一部の細胞に、oatp3のシグナルを神経節細胞に認めた。網膜の免疫組織染色では、oatp2はRPEの視細胞側が特に強く染色され、oatp3では視神経、神経線維層から外顆粒層まで広範囲に染色された。ラット前眼部の検討では、虹彩・毛様体、角膜ともoatp2とoatp3の発現が認められた。前眼部の免疫組織化学では、角膜、虹彩、毛様体の各上皮細胞に染色がみられた。以上の結果から、眼内でのoatpの局在についてまとめると、oatp2は血液網膜関門を構成するRPEの視細胞側に発現し、RPEでの甲状腺ホルモンなどのナトリウム非依存性輸送に関係すると考えられた。また、oatp3は主に視神経線維に存在し、基質の輸送に関与していること示された。一方、前眼部ではoatp2とoatp3が毛様体無色素上皮細胞に発現し、血液房水関門における有機アニオン類輸送への関与が考えられた。角膜上皮はバリアーを形成していないが、甲状腺ホルモンのように脂溶性が低く、分子量の大きい物質の輸送にトランスポーターが関与することが示唆された。また、甲状腺ホルモンの結合蛋白であるトランスサイレチンは、RPEでも合成されビタミンAと結合し、そのvisual cycleにおいて重要な役割を果たしていることが知られている。したがって、RPEで特に強い発現が認められるoatp2が、甲状腺ホルモンのみならすビタミンAの輸送も担う可能性が考えられた。

钠非依赖性有机阴离子转运蛋白是一种与甲状腺激素、类固醇、前列腺素等结合的结构蛋白，在细胞间药物转运中具有重要功能，Oatp1、oatp2和oatp3被称为转运蛋白基因。在我们的原位杂交中，我们在视网膜色素上皮 (RPE) 和内核层的一些细胞中检测到 oatp2 信号，在神经节细胞中检测到 oatp3 信号。在视网膜的免疫组织化学染色中，oatp2在RPE的光感受器侧染色特别强烈，而oatp3从视神经和神经纤维层到外核层广泛染色。在对大鼠眼前节的检查中，在虹膜、睫状体和角膜中观察到oatp2和oatp3的表达。眼前节的免疫组织化学显示角膜、虹膜和睫状体的上皮细胞染色。从以上结果，我们可以总结出oatp在眼内的定位在RPE的光感受器侧表达，其构成血-视网膜屏障，并且被认为参与甲状腺激素和钠依赖性的转运。 RPE 中的其他物质已完成。还表明oatp3主要存在于视神经纤维中并参与底物运输。另一方面，在眼前段，oatp2和oatp3在非色素性睫状上皮细胞中表达，表明它们参与血-房水屏障处的有机阴离子转运。尽管角膜上皮不形成屏障，但有人认为转运蛋白参与转运低脂溶性和大分子量的物质，例如甲状腺激素。此外，转甲状腺素蛋白（一种甲状腺激素结合蛋白）也在 RPE 中合成，与维生素 A 结合，并且已知在视觉周期中发挥重要作用。因此，人们认为在 RPE 中表达特别强烈的 oatp2 可能不仅负责运输甲状腺激素，还负责运输维生素 A。