血管新生抑制物質による多発性骨髄腫の新規治療法(遺伝子治療)の開発

使用血管生成抑制剂开发多发性骨髓瘤新治疗方法（基因治疗）

• 批准号: 14571003
• 负责人: 三宅 弘一
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14571003/
• 关键词: 血管新生抑制物質; 多発性骨髄腫; ウイルスベクター; 遺伝子治療; 血管新生抑制物質; 多発性骨髄腫; ウイルスベクター; 遺伝子治療

近年多発性骨髄腫の発症、および病状の進展に骨髄内部をはじめとし、腫瘍細胞部分での微少血管新生の関与が報告されている。本研究では血管新生抑制物質による多発性骨髄腫の遺伝子治療法の開発を目的としており、本年度は以下のような検討を行った。1)血管新生抑制物質(angiostatin, endostatin, FLT1,FLK1)をCAGプロモーターより発現するレンチウイルスを作成し、組換えウイルスを濃縮し、高力価なものを得た。2)作成したウイルスベクターの効果を血管内皮細胞を用い、細胞増殖抑制効果をin vitroにて検討したところFLK1>FLT1>endostatin>angiostatinの順に細胞増殖抑制効果を認めた。3)多発性骨髄腫の治療モデルマウスとして多発性骨髄腫腫瘍細胞(ARH77)をSCIDマウスに移植すると同時にSCIDマウスの骨髄細胞に血管新生抑制物質を発現するレンチウイルスベクターを導入し移埴を行い、それぞれの血管新生抑制物質の効果を血中IgG、Ca濃度、骨病変、骨髄中の血管新生増殖抑制所見、腫瘍細胞数、生存期間などにより検討したところ、in vivoと同様にFLK1>FLT1>endostatin>angiostatinの順に腫瘍細胞増殖抑制効果を認めた。今後、複数の血管新生抑制物質の使用による相乗効果、最も有効な遺伝子導入法の検討、さらには臨床応用に向けての安全性や副作用の検討も行う。

近年来，在多发性骨髓瘤的发展和病情进展中，已经报道了包括骨髓在内的肿瘤细胞部分中微血管生成的参与。这项研究旨在使用血管生成抑制剂开发用于多发性骨髓瘤的基因疗法，今年我们进行了以下研究。 1）制备了表达血管生成抑制剂的慢病毒（Angiostatin，angiostatin，flt1，flk1）使用CAG启动子制备，并浓缩重组病毒以获得高滴度。 2）通过使用血管内皮细胞在体外检查了引起的病毒载体的抑制作用，从而对细胞增殖的抑制作用进行了抑制作用，并以FLK1> flt1> flt1> flt1> endostatin> angiostatin的顺序观察到抑制细胞增殖的作用。 3）将多个骨髓瘤肿瘤细胞（ARH77）植入SCID小鼠中作为多发性骨髓瘤治疗的模型小鼠，同时，将表达血管生成抑制剂的慢病毒载体引入SCID小鼠的骨髓细胞中并进行了移植。根据血管生成，CA浓度，骨骼病变，新血管增生的抑制发现，在骨髓中，肿瘤细胞计数，生存期等以及肿瘤细胞增殖抑制作用在FLK1> flt1> flt1> flt1> blk1> blk1> blk1> blk1> beltostosticatin and angiostotaTIN时观察到，对每种血管生成抑制剂的作用进行了检查。将来，我们将考虑使用多种血管生成抑制剂的协同作用，检查最有效的基因转移方法，并检查临床应用的安全性和副作用。