レクザイムによる細胞死に関する研究

酶引起的细胞死亡的研究

• 批准号: 09240228
• 负责人: 仁田 一雄
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Tohoku Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09240228/
• 关键词: レクザイム; シアル酸結合性レクチン; リボヌクレアーゼ; 細胞死; アポトーシス

アカガエル属カエル卵由来のシアル酸結合性レクチン(SBL)は,レクチン活性ばかりではなくリボヌクレアーゼ(RNase)活性をも合わせ持つタンパク質分子であり,これらをレクザイム(leczyme)と呼ぶことを提唱している.ウシガエル卵由来のSBL(cSBL)の細胞増殖抑制作用の発現には,この2つの機能が連続して係わっていることを明らかにしている.cSBLにより引き起こされる細胞死がアポトーシス様のものであるか否か,また細胞死誘導時の細胞表面糖鎖の変化について検討した.cSBL処理によりP388細胞ではRNA分解が初期に観察されたが,それに伴いアポトーシス様の細胞死に見られる典型的な形態変化とDNA断片化が観察された.アポトーシス細胞ではRNA代謝回転速度が増加していることが知られており,細胞内に取り込まれたcSBLがRNase活性を発揮することがアポトーシス誘導に重要であると推測された.cSBL処理による細胞死誘導時の細胞表面糖鎖の変化をフローサイトメーターにて検討したところ,シアル酸残基を含む糖鎖が増加することが明らかとなった,また同時に,アポトーシス関連抗原であるFas抗原および腫瘍壊死因子レセプター(TNFR)の発現も増加した.benzyl-α-GalNAc処理P388細胞では細胞死は認められないが,P388細胞の場合と同様,これらの細胞表面抗原の発現増加が認められた.cSBL処理によるシアリルトランスフェラーゼ(ST)の発現増加をRT-PCR法にて検討したところ,細胞表面のシアル酸残基を含む糖鎖の増加とパラレルに,STの発現も増加した.SBL処理によりアポトーシス様の細胞死が誘導され,この時,細胞表面のシアル酸量が増加した.このシアル酸を有する糖鎖のキャリアー分子がTNFRである可能性が示唆された.

源自杜鹃属蛙卵的唾液酸结合凝集素（SBL）是不仅具有凝集素活性而且具有核糖核酸酶（RNase）活性的蛋白质分子，并且我们提议将它们称为凝集酶。已经揭示了这两种功能。依次参与来自牛蛙卵的SBL(cSBL)的细胞增殖抑制作用的表达。我们研究了细胞死亡是否与细胞凋亡相似，并且最初在 cSBL 处理后在 P388 细胞中观察到诱导细胞死亡时细胞表面糖链的变化，但与此同时，也观察到了细胞凋亡样细胞死亡。已知在凋亡细胞中观察到典型的形态变化和DNA断裂，并且cSBL进入细胞后发挥RNase活性。当我们使用流式细胞仪检查cSBL处理诱导细胞死亡时细胞表面糖链的变化时，很明显含有唾液酸残基的糖链增加了，同时，凋亡相关抗原Fas抗原和肿瘤坏死因子受体（TNFR）的表达也增加。苯甲基-α-GalNAc处理的P388细胞中未观察到细胞死亡，但与P388细胞相似。当通过RT-PCR检测cSBL处理引起的唾液酸转移酶(ST)表达的增加时，观察到这些细胞表面抗原的表达增加，发现含有唾液酸的糖链数量增加。细胞表面和平行的残留物另外，SBL处理后表达也增加，诱导细胞凋亡样死亡，此时细胞表面的唾液酸量增加，可能是含有这种唾液酸的糖链的载体分子。建议是TNFR。

项目成果

Masachika Irie: "Biochemistry of frog ribonucleases" Cellular and Molecular Life Sciences. 54(印刷中). (1998)

Masachika Irie：“青蛙核糖核酸酶的生物化学”《细胞和分子生命科学》54（出版中）。