平滑筋におけるカルシウムシグナルと収縮の分子機序

平滑肌钙信号和收缩的分子机制

基本信息

批准号：
03268212
负责人：
藤井敏弘
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

平滑筋における収縮の調節はアクチン側とミオシン側の2つの経路が存在する。本年度はアクチン側の経路に焦点をあて、これに係わるファクタ-の探索を行った。ニワトリ砂嚢平滑筋より収縮制御因子として、p33(カルポニン)の分離とその諸性質を調べた。この抗体を作製し、native thin filamentsの構成成分であることや血管平滑筋中に分子量が異なるタイプが存在することを見い出している。カルシウムイオンによる収縮へのシグナルはカルモデュリンを介してカルデスモン,ミオシン軽鎖キナ-ゼヘ伝えられることが知られている。我々はS100タンパクがカルシウムシグナルをカルデスモンーアクチン系に伝達することを既に報告している。本年度はS100タンパクがp33ーアクチン間の結合を制御することを見い出している。また、アネキシンファミリ-に属するカルシメジンやp80,p11などの(a^<2+>ー結合タンパク質を平滑筋より単離し、カルデスモン,p33の機能調節への関与を調べたところいずれも影響を与えなかった。血管平滑筋は内皮細胞の有無などの環境変化に応じ、そのphenotypeが変化する。そこでラット頚動脈を材料とし、バル-ンカテ-テルで血管内皮細胞を剥離後の平滑筋の収縮関連タンパク質の発現,分布等の変動を本年度から調べ始めた。収縮型と比較して肥厚した内膜に分布する合成型平滑筋においては低分子量型のカルデスモンが出現していることやp33の含量が非常に低下していることが生化学,形態学の手法を用いて見い出している。バル-ン法は血栓の除去に使用されており、血管内皮細胞と平滑筋の関係を調べる有効な手段のひとつであるため、次年度はこのテ-マを中心とし取組むことを計画している。

平滑肌收缩的调节有两种途径：肌动蛋白和肌球蛋白。今年，我们重点关注肌动蛋白侧通路并寻找相关因素。我们从鸡砂囊平滑肌中分离出 p33（钙调蛋白）作为收缩调节剂，并研究了其特性。我们创建了这种抗体，并发现它是天然细丝的组成部分，并且血管平滑肌中存在不同分子量的类型。已知钙离子引起的收缩信号通过钙调蛋白传递至钙结合蛋白和肌球蛋白轻链激酶。我们之前报道过S100蛋白将钙信号传递至钙结合蛋白-肌动蛋白系统。今年，我们发现S100蛋白控制p33和肌动蛋白之间的结合。此外，当我们从平滑肌中分离出（a^<2+>>-结合蛋白，如属于膜联蛋白家族的钙调素、p80和p11），并研究它们参与调节caldesmon和p33的功能时，它们都没有任何效果。血管平滑肌的表型根据环境变化而变化，例如内皮细胞的存在或不存在。我们以大鼠颈动脉为材料，使用球囊导管去除血管内皮细胞后分析了平滑肌收缩相关蛋白的起源。的我们从今年开始调查分布的变化。与收缩型相比，我们发现增厚内膜中分布的合成平滑肌中出现了低分子量型的caldesmon，而且p33的含量明显较高。生物化学，减少的形式由于球囊法用于清除血栓，是研究血管内皮细胞和平滑肌关系的有效手段，因此我们明年将把重点放在Ma上。