Comprehensive search for host factors related to liver fibrosis mechanisms and development of novel therapeutic strategies

全面寻找肝纤维化机制相关宿主因素并开发新的治疗策略

• 批准号: 22H03050
• 负责人: 坂本 直哉
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H03050/
• 关键词: 肝線維化

本研究は，従来非可逆的とされていた肝硬変症の組織病態を積極的に修復する手法を開発するために，肝硬変の組織病態の修復機構を解析し、肝星細胞を標的とした細胞・薬物療法による肝線維化の組織修復を促進する治療法の効果、作用機構等を解析することを目的として遂行し、以下の成果を得た。1. 血清組織糖鎖修飾構造の網羅的探索： ●NAFLDの線維化の進展に伴い患者血清中のA2F bisect 糖鎖の発現が疾患特異的に上昇することを示した。2. 培養星細胞をもちいた肝線維化・修復に関連する成分分析：● A2F bisect糖鎖のキャリア蛋白としてIgAをはじめとする複数の蛋白を同定した。●活性化培養ヒト肝星細胞の細胞および培養上清の包括的糖鎖分析により、2種のN-結合型フコース含有糖鎖が著明上昇することを見いだし、それらのキャリア蛋白として既知のM2BPに加え、フィブロネクチンをはじめとする複数の蛋白を同定した。●同定された糖鎖修飾構造、キャリア蛋白の修飾の線維化進展に与える影響を解析する。また、糖鎖修飾構造に対する特異抗体を用いた星細胞活性化抑制効果についても解析を進める。● 培養肝星細胞活性化に関連するmicro RNAの包括的解析を施行し、miR-29a、miR-449a、その他特定のmiRNAが活性化星細胞で高発現し、knock downにより星細胞alpha-SMA、type-I collagen発現が抑制されることを示した。Pathway解析では、これらのmiRNAは細胞骨格、細胞外マトリックス、chemotaxis関連経路の蛋白の発現を調節していることが明らかとなった。● C型肝炎SVR後発癌症例では血清中のAng2が有意に高値であり、治療標的としての可能性が示された。

进行这项研究的目的是分析以前认为不可逆的肝硬化的修复机制，目的是分析使用肝脏类细胞的细胞/药物治疗促进肝纤维化的治疗作用的作用和机制，并促进肝Stellate细胞，并促进以下结果。 1。全面寻找血清组织糖基化：●这项研究表明，随着NAFLD纤维化的进展，患者血清中A2F二分球的表达特异性地增加了疾病。 2。与肝纤维化和用培养的星细胞修复有关的成分分析：●包括IgA在内的多种蛋白质被鉴定为A2F二方聚糖的载体蛋白。 ●对活化培养的人肝星状细胞的细胞和培养上清液进行的全面糖基化分析表明，两个N-连接的含糖糖糖链显着增加，除M2BP外，还标识了包括纤维蛋白在内的多种蛋白质的M2BP。 ●分析已鉴定的聚糖修饰结构和载体蛋白修饰对纤维化进展的影响。此外，将对使用特定抗体对糖基化修饰结构抑制星形胶质细胞激活的作用进行分析。 ●我们对与培养的肝星状细胞激活相关的微RNA进行了全面分析，并表明miR-29a，miR-449a和某些其他miRNA在活化的星形胶质细胞中高度表达，并敲除抑制星形胶质细胞Alpha-SMA和型I型胶原蛋白的表达。途径分析表明，这些miRNA调节细胞骨架，细胞外基质和趋化性相关途径中蛋白质的表达。 ●在以后发作丙型肝炎SVR的情况下，血清中的ANG2水平明显更高，表明是治疗靶点的可能性。

项目成果

Simultaneous determination of heparan sulfate, chondroitin/dermatan sulfates, and hyaluronan glycosaminoglycan disaccharides by high-performance liquid chromatography using a reverse-phase column with adamantyl groups

使用金刚烷基反相柱通过高效液相色谱同时测定硫酸乙酰肝素、硫酸软骨素/硫酸皮肤素和透明质酸糖胺聚糖二糖

• DOI: 10.1016/j.chroma.2022.463748
• 发表时间: 2023
• 期刊: Journal of Chromatography A
• 影响因子: 4.1
• 作者: Hanamatsu Hisatoshi;Makino Satoshi;Ohara Masatsugu;Suda Goki;Yokota Ikuko;Nishihara Shoko;Sakamoto Naoya;Furukawa Jun-ichi
• 通讯作者: Furukawa Jun-ichi

The potential of soluble CD14 in discriminating nonalcoholic steatohepatitis from nonalcoholic fatty liver disease

• DOI: 10.1111/hepr.13757
• 发表时间: 2022-02-22
• 期刊: HEPATOLOGY RESEARCH
• 影响因子: 4.2
• 作者: Nakamura, Akihisa;Yamamoto, Koji;Sakamoto, Naoya
• 通讯作者: Sakamoto, Naoya