Establishment of transcriptome engineering technique using PPR protein

PPR蛋白转录组工程技术的建立

• 批准号: 22H02611
• 负责人: 中村 崇裕
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02611/
• 关键词: RNA; ゲノム編集; 翻訳; PPR; トランスクリプトーム編集; PPR protein; transcriptome; engineering

本課題では、本申請では我々が開発したPPR技術を利用したトランスクリプトーム編集技術のうち、未だ技術的に未成熟な「翻訳制御」に着目し、同技術の動物培養細胞、動物個体への適用を進めることによって医療応用にむけたProof-of-conceptを獲得するとともに、これまでの研究で示唆された未知の翻訳開始機構の解明に取り組むことを目的としている。本年度は、項目1. 「翻訳制御技術の動物個体への適用」について、同技術の動作安定性の検証や小型化を進めるとともに、AAVベクターへの搭載、培養細胞を用いたPPR分子の導入効率、翻訳活性化の効果を比較検証した。また、疾患関連遺伝子mRNA数種を標的として、当技術の医療適用可能性を検証した。項目2. 「新規の翻訳開始機構の解明」については、培養細胞を用いて、翻訳活性化効果を示すPPR分子を免疫沈降することで、細胞内での標的RNAや協同因子との結合を解析する実験系の確立を進めた。

在此应用程序中，该应用程序集中在技术“翻译控制”上，在使用我们开发的PPR技术的转录组编辑技术中，它仍然是不成熟的，用于同一技术的动物文化细胞和动物。 - 通过促进应用程序的概念概念，并致力于阐明先前研究中建议的未知翻译起始机制。在这个财政年度，关于“将翻译控制技术应用于动物个体”，该技术的运行稳定性被促进并较小，并且使用培养基的PPR分子的引入效率安装在AAV载体上。比较。此外，该技术的医学应用被证实为几种相关疾病相关基因mRNA的靶标。项目2。关于“阐明新的翻译起始机制”，通过免疫PPR分子对靶标RNA和合作社的结合进行分析，这表明我们使用培养细胞建立了一个实验系统。