Understanding of the substrate recognition of staphylococcal exotoxins and prevention strategies

葡萄球菌外毒素底物识别的认识及防治策略

• 批准号: 22H02515
• 负责人: 西藤 公司
• 金额: $ 10.15万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02515/
• 关键词: ブドウ球菌; 外毒素; デスモグレイン; 接触残基; トキソイド; 表皮剥脱毒素

令和4年度は、これまでに解明されていなかった表皮剥脱毒素の結晶構造解析を進めたと共に、外毒素-基質間の特異性を確認するために以下の研究を行った。1．黄色ブドウ球菌に由来する表皮剥脱毒素ETDの組換えタンパク質を作製して結晶構造解析を実施した。2．毒素基質混合液中に存在する組換え毒素の検出を容易にするため、S aureus ETA, ETB, ETD, S. hyicus ExhA, ExhB, ExhC, ExhD, S. pseudintermedius ExpA, ExpBのC末端にHA tagを挿入した組換え毒素を作製し、組換え毒素が宿主由来のdesmoglein 1 (Dsg1) を消化することを確認した。3．分子ドッキング法により、ETAとヒトDsg1との複合体、ならびにExhCとブタDsg1との複合体を構成するために必要な、毒素分子内の予測接触残基を推定した。

2020年度，我们进行了迄今为止尚未阐明的表皮剥脱毒素的晶体结构分析，并进行了以下研究以确认外毒素和基质之间的特异性。 1.我们构建了ETD（一种源自金黄色葡萄球菌的表皮脱落毒素）的重组蛋白，并分析了其晶体结构。 2.为了便于检测毒素底物混合物中存在的重组毒素，将 HA 标签附着到金黄色葡萄球菌 ETA、ETB、ETD、S. hyicus ExhA、ExhB、ExhC、ExhD、S. pseudintermedius ExpA、我们创建了插入该重组毒素的重组毒素，并确认该重组毒素消化了宿主来源的桥粒芯糖蛋白 1 (Dsg1)。 3.使用分子对接方法，我们估计了构建 ETA 和人 Dsg1 之间的复合物以及 ExhC 和猪 Dsg1 之间的复合物所需的毒素分子内的预测接触残基。