マンソン裂頭条虫擬充尾虫が産生する生理活性物質についての研究

曼氏绦虫产生的生理活性物质的研究

• 批准号: 15590368
• 负责人: 平井 和光
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15590368/
• 关键词: マンソン裂頭条虫; マクロファージ; サイトカイン; 破骨細胞; MAPK経路; 免疫抑制物質; Plerocercoid Immunosuppressive Factor

マンソン裂頭条虫擬充尾虫が産生する排泄・分泌物質(ES物質)は、マウスマクロファージのMAPK経路のリン酸化を抑制することによってTNF-α,IL-1β,iNOSの遺伝子発現を抑制し、そしてマウスの骨髄細胞をM-CSFとRANKLにて供刺激して分化する破骨細胞-酒石酸抵抗性フォスファターゼ陽性の多核細胞-の分化も同様に抑制することを明らかにした。そこで、これらのサイトカイン遺伝子発現および破骨細胞分化を抑制する物質を次のようなステップで粗ES物質から精製することを試みた。1.擬充尾虫1隻/1mL DMEMで培養して得た培養上清を25mM Tris-HCl(pH 7.4)に対して透析後、Amicon Ultra-15 Centrifugal Filter Unitにて限外濾過し、0.22μm filterにて濾過した試料を粗ES物質とした。2.粗ES物質をMonoQ HR5/5カラムにてイオン交換クロマトグラフィーを施行し、0.3M NaClにて溶出した分画に活性が存在した。3.0.3M NaCl溶出分画をRCA120 Agarose column 次いでWGA Agarose columnにて分画し、90kDa相当の分子サイズを有する単一バンドに収斂する糖タンパク質を得た。4.20mgの粗ES物質から2.0μgの90kDa糖タンパク質が精製され、Plerocercoid Immunosuppressive Factor(P-ISF)と命名した。

曼氏绦虫产生的排泄和分泌物质（ES物质）通过抑制小鼠巨噬细胞中MAPK通路的磷酸化来抑制TNF-α、IL-1β和iNOS的基因表达，他们还证明了对小鼠骨髓细胞的刺激作用。 M-CSF 和 RANKL 类似地抑制破骨细胞（抗酒石酸磷酸酶阳性多核细胞）的分化。因此，我们尝试使用以下步骤从粗 ES 材料中纯化抑制这些细胞因子基因表达和破骨细胞分化的物质。 1. 将在 1 mL DMEM 中培养得到的培养上清液用 25mM Tris-HCl (pH 7.4) 进行透析后，使用 Amicon Ultra-15 Centrifugal Filter Unit 进行超滤，得到 0.22 μm 过滤器过滤的样品作为粗ES材料。 2.使用MonoQ HR5/5柱对粗ES材料进行离子交换层析，并在用0.3M NaCl洗脱的级分中发现活性。将 3.0.3M NaCl 洗脱级分在 RCA120 琼脂糖柱上进行分级，然后在 WGA 琼脂糖柱上进行分级，以获得会聚成分子大小相当于 90 kDa 的单个条带的糖蛋白。从 4.20 mg 粗 ES 材料中纯化出 2.0 μg 90 kDa 糖蛋白，命名为 Plerocercoid 免疫抑制因子 (P-ISF)。

项目成果

Progress of Medical Parasitology in Japan: 3.Spirometra erinaceieuropaei (2)Growth hormone-like Factor produced by Plerocercoids of Spirometra erinaceieuropaei

日本医学寄生虫学进展：3. erinaceieuropaei 螺旋体 (2) erinaceieuropaei 螺旋体产生的生长激素样因子

• 发表时间: 2003
• 作者: Kim YH;Ishii G;et al.;M.Maruyama.;Kazumitsu Hirai
• 通讯作者: Kazumitsu Hirai

マンソン裂頭条虫によるマクロファージの抑制作用

曼氏带绦虫对巨噬细胞的抑制作用

• 发表时间: 2003
• 期刊: 臨床免疫 29(2)
• 作者: Miyamaoto S;Ishii G;et al.;福本宗嗣
• 通讯作者: 福本宗嗣

Regulation of TNF-a, IL-1b and ICAM-1 gene expression in THP-1 monocytes stimulated with Plasmodium falciparum-cultured medium by excretory/secretory

排泄/分泌对恶性疟原虫培养基刺激的 THP-1 单核细胞中 TNF-a、IL-1b 和 ICAM-1 基因表达的调节

• 发表时间: 2004
• 期刊: Yonago Acta medica 47
• 作者: Miyamaoto S;Ishii G;et al.;Zhiliang.Wu;Paramasari Dirgahayu
• 通讯作者: Paramasari Dirgahayu

Excretory/secretory products from plerocercoids of Spirometra erinaceieuropaei suppress interleukin-1β gene expression in murine macrophages.

erinaceieuropaei 螺旋体的排泄/分泌产物抑制小鼠巨噬细胞中白介素-1β 基因的表达。

• 发表时间: 2004
• 期刊: International Journal for parasitology 34(5)
• 作者: Yoshino T;Sato E;Nakashima T;Nagashima W;Teratani MA;Nakayama A;Mori N;Murakami H;Funahashi H;Imai T.;Paramasari Dirgahayu
• 通讯作者: Paramasari Dirgahayu

Paramasari Dirgahayu: "Regulation of TNF-α, IL-1β and ICAM-1 gene expression in THP-1 monocytes stimulated with plasmodium falciparum cultured medium by excretory/secretory products from Spirometra erinaceieuropaei plerocercoids"Yonago Acta Medica. 47・1.

Paramasari Dirgahayu：“用来自Spirometra erinaceieuropaei plerocercoids的排泄/分泌产物刺激的THP-1单核细胞中TNF-α、IL-1β和ICAM-1基因表达的调节”Yonago Acta Medica。