Molecular basis of centromeric chromatin required for equal chromosome segregation

染色体平等分离所需的着丝粒染色质的分子基础

基本信息

批准号：
14380334
负责人：
TAKAHASHI Kohta
金额：
$ 9.41万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14380334/
关键词：
Chromosome Centromere CENP-A Fission yeast Nucleosome

项目摘要

CENP-A is a centromere-specific histone H3 variant, essential for faithful chromosome segregation. We genetically identified two factors, Mis6 and Ams2, each of which is required for the correct centromere localisation of Cnp1, the fission yeast homologue of CENP-A. In this project, we elucidated following molecular features of Mis6, Ams2 and Cnp1.1.As a multicopy suppressor for mis6-302 mutant, we identified Sim4/Mix1 which forms a stable complex with Mis6. We showed that the Mis6-Sim4 subcomplex is required for mitotic localization of Mad2, but not Bub1, spindle checkpoint protein at centromeres. Furthermore, we demonstrated that Nuf2 is required for maintaining the Mis6-complex on the kinetochore during mitosis. The Mis6-complex physically interacts with Mad2 under the condition that the Mad2-dependent checkpoint is activated. Ectopically expressed Mis6^<1-265> fragment localizes along the mitotic spindle, highlighting the potential binding ability of Mis6 to the spindle microtubule … More s. We propose that the Mis6-complex, in collaboration with the Nuf2-complex, monitors the spindle-kinetochore attachment state and act as a platform for Mad2 to accumulate at unattached kinetochores.2.We demonstrated that there are at least two distinct phases of Cnp1 loading during the cell cycle. A GATA-type transcription factor, Ams2, promotes transcriptional activation of histone genes during S phase and aids in efficient loading of Cnp1 into duplicated centromeres. In Ams2-null cells, Cnp1 fails to localise to centromeres following the passage of S phase ; however, it accumulates again gradually via a backup reloading pathway, which occurs during G2, the gap phase between DNA replication and nuclear division in mitosis. Shortening of G2 length in Ams2-null cells results in marked reduction of Cnp1 accumulation at centromeres, leading to mitotic cell death with chromosome missegregation. The flexibility of Cnp1 loading may account for the plasticity of centromere formation when the authentic centromere is damaged. Less

CENP-A 是一种着丝粒特异性组蛋白 H3 变体，对于忠实的染色体分离至关重要，我们从基因上鉴定出了两个因子：Mis6 和 Ams2，其中每个因子都是 CENP-A 的裂殖酵母同源物 Cnp1 正确着丝粒定位所必需的。在这个项目中，我们阐明了Mis6、Ams2和Cnp1.1的以下分子特征。作为mis6-302突变体的多拷贝抑制子，我们鉴定出 Sim4/Mix1 与 Mis6 形成稳定的复合物。我们表明，Mis6-Sim4 亚复合物是 Mad2 的有丝分裂定位所必需的，但在着丝粒处的纺锤体检查点蛋白 Bub1 则不需要。此外，我们还证明了 Nuf2 是维持 Mis6 所必需的。有丝分裂过程中动粒上的 Mis6 复合物在 Mad2 依赖性检查点被异位激活的情况下与 Mad2 发生物理相互作用。表达的 Mis6^<1-265> 片段沿着有丝分裂纺锤体定位，突出了 Mis6 与纺锤体微管的潜在结合能力……我们建议 Mis6 复合体与 Nuf2 复合体合作监测纺锤体。着丝粒附着状态并充当 Mad2 在未附着着丝粒处积累的平台。2.我们证明，在细胞过程中至少有两个不同的 Cnp1 加载阶段GATA 型转录因子 Ams2 在 S 期促进组蛋白基因的转录激活，并有助于将 Cnp1 有效加载到复制的着丝粒中，在 Ams2 缺失的细胞中，Cnp1 在经过 S 期后无法定位到着丝粒。然而，它通过备用重载途径再次逐渐积累，该途径发生在 G2 期间，即有丝分裂中 DNA 复制和核分裂之间的间隙期。 Ams2 缺失细胞导致着丝粒处 Cnp1 积累显着减少，导致有丝分裂细胞死亡并伴有染色体错误分离。当真正的着丝粒受损时，Cnp1 负载的灵活性可能解释了着丝粒形成的可塑性。

项目成果

期刊论文数量（29）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Does a GATA factor make a bed for centromeric nucleosomes?

GATA 因子是否为着丝粒核小体提供床？

DOI：
发表时间：
2003
期刊：
Cell Cycle 12
影响因子：
0
作者：
Chen ES
通讯作者：
Chen ES

Ee Sin Chen: "A cell cycle-regulated GATA factor promotes centromeric localization of CENP-A in fission yeast"Molecular Cell. 11(1). 175-187 (2003)

Ee Sin Chen：“细胞周期调节的 GATA 因子促进裂殖酵母中 CENP-A 的着丝粒定位”《分子细胞》。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Chromosome cohesion and segregation. The Molecular Biology in Fission Yeast (Egel R., Ed.)

染色体凝聚和分离。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
影响因子：
0
作者：
Takahashi K;Yanagida M.
通讯作者：
Yanagida M.

Chromosome cohesion and segregation. in "The molecular biology in fission yeast"

染色体凝聚和分离。

DOI：
发表时间：
2003
期刊：
影响因子：
0
作者：
Sarma K;Nishioka K;Reinberg D;Kohta Takahashi;Aki Minoda;Tatsuro Yuasa;Takeshi Hayashi;Kohta Takahashi
通讯作者：
Kohta Takahashi

Chromosome cohesion and segregation. In The Molecular Biology in Fission Yeast (Egel R., Ed.)

染色体凝聚和分离。