翻訳後修飾による細胞選択的な鉱質コルチコイド受容体制御系の全容解明

通过翻译后修饰完整阐明细胞选择性盐皮质激素受体控制系统

• 批准号: 26893277
• 负责人: 柴田 茂
• 金额: $ 0.92万
• 依托单位: Teikyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-08-29 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26893277/
• 关键词: 鉱質コルチコイド受容体; リン酸化; 慢性腎臓病; 高血圧

申請者らは鉱質コルチコイド受容体 (MR) の病的な活性化が食塩に関連した臓器障害に中心的な役割を果たすことを明らかにし、MR阻害薬が慢性腎臓病（CKD）の治療薬として有望であることを報告した (Shibata et al. Nat Med 2008, J Clin Invest 2011)。またMRの活性調節機構としてリガンド結合領域のリン酸化の重要性を示した (Shibata et al. Cell Met 2013)。本研究は腎臓におけるMR制御機構の全貌解明を主目的とする。(1) MRのリン酸化を担うキナーゼを同定するため、リン酸化サイトおよび周囲配列に相当するペプチドを合成し、リコンビナント・キナーゼとの反応によるスクリーニングを開始した。最終的には400にも上る候補キナーゼについて、in vitroでのMRのリン酸化作用の評価を目指している。同定されたキナーゼについてはRNAiノックダウン等の手法を用いて細胞内でのリン酸化作用を確認する。(2) 上記(1)で同定したキナーゼ分子についてCKDモデルにおける活性の変化を検討し、また組織特異的遺伝子改変動物の作出を試みる。これらの結果から、CKDにおける病的なMRシグナル活性化のメカニズムが解明され、CKD治療薬の創生にむけた新規標的分子の同定が期待される。

申请人揭示了盐皮质激素受体（MR）的病理激活在盐相关器官损伤中发挥着核心作用，并且MR抑制剂可用于治疗慢性肾病（CKD），据报道其作为药物很有前途（Shibata等人）。 .Nat Med 2008，J Clin Invest 2011）。我们还证明了配体结合区磷酸化作为调节 MR 活性机制的重要性（Shibata 等人，Cell Met 2013）。本研究的主要目的是阐明肾脏中整个 MR 控制机制。 (1)为了鉴定负责MR磷酸化的激酶，我们合成了与磷酸化位点及其周围序列相对应的肽，并通过与重组激酶反应开始筛选。最终，我们的目标是在体外评估 MR 对多达 400 种候选激酶的磷酸化作用。对于已鉴定的激酶，将使用RNAi敲低等方法来确认细胞内的磷酸化作用。 (2)我们将在CKD模型中检查上述(1)中确定的激酶分子活性的变化，并尝试创建组织特异性转基因动物。这些结果有望阐明 CKD 中病理性 MR 信号激活的机制，并确定用于创建 CKD 疗法的新靶分子。

项目成果

Phosphorylation-dependent regulation of the MR in intercalated cells.

闰细胞中 MR 的磷酸化依赖性调节。

• 发表时间: 2015
• 作者: Mikami Y;Tsuda H;Akiyama Y;Honda M;Shimizu N;Suzuki N;Komiyama K;Shibata S et al.;Shigeru Shibata
• 通讯作者: Shigeru Shibata

腎臓におけるミネラルコルチコイド受容体の活性化機構

肾脏盐皮质激素受体的激活机制

• 发表时间: 2015
• 作者: Mikami Y;Tsuda H;Akiyama Y;Honda M;Shimizu N;Suzuki N;Komiyama K;Shibata S et al.;Shigeru Shibata;柴田 茂
• 通讯作者: 柴田 茂

翻訳後修飾による体液調節機構と高血圧診療における意義

翻译后修饰的体液调节机制及其在高血压治疗中的意义

• 发表时间: 2014
• 作者: Mikami Y;Tsuda H;Akiyama Y;Honda M;Shimizu N;Suzuki N;Komiyama K;Shibata S et al.;Shigeru Shibata;柴田 茂;柴田 茂
• 通讯作者: 柴田 茂

食塩、アルドステロンと高血圧

盐、醛固酮和高血压

• 发表时间: 2014
• 作者: Mikami Y;Tsuda H;Akiyama Y;Honda M;Shimizu N;Suzuki N;Komiyama K;Shibata S et al.;Shigeru Shibata;柴田 茂;柴田 茂;柴田 茂
• 通讯作者: 柴田 茂