蝸牛発生の制御機構解明

阐明耳蜗发育的控制机制

基本信息

批准号：
24890099
负责人：
楯谷智子
金额：
$ 1.91万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-08-31 至 2014-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は哺乳類蝸牛を研究対象とし、実験はすべてマウスを用いておこなった。蝸牛感覚上皮の発生の分子メカニズムの解明のため、まず生体内および試験管内の培養蝸牛においてシグナル伝達系を複数操作し、感覚上皮発生各時期における関与・相互作用を調べた。操作するシグナル伝達系はNotchシグナル伝達系、ヘッジホッグシグナル伝達系、FGFシグナル伝達系、TGFβ/BMPシグナル伝達系であり、①生体内での操作：特定の遺伝子を時期・部位特異的に遺伝子を欠損または過剰発現させるコンディショナルノックアウトマウスまたはコンディショナル持続発現マウス、②試験管内の培養蝸牛での操作：シグナル伝達系の関連遺伝子を過剰発現させるプラスミドベクターを電気穿孔法にて培養蝸牛に導入、③試験管内の培養蝸牛での操作：培地にシグナル伝達を促進あるいは阻害する薬品又はタンパク質添加、を組み合わせた。平成2４年度には、感覚上皮前駆細胞において遺伝子組み替えが起こるマウスを用いて、蝸牛感覚上皮が発生する過程のうち感覚上皮前駆細胞から有毛細胞・支持細胞に分化する段階につき、Notchシグナル伝達系とヘッジホッグシグナル伝達系、ヘッジホッグシグナル伝達系とFGシグナル伝達系F、Notchシグナル伝達系とFGFシグナル伝達系、Notchシグナル伝達系とTGFβ/BMPシグナル伝達系の操作を行なった。このうちNotchシグナル伝達系とヘッジホッグシグナル伝達系、ヘッジホッグシグナル伝達系とFGFシグナル伝達系の組み合わせで得られた結果については論文にまとめ投稿中である。また、薬剤誘発性の遺伝子組み替えを感覚上皮前駆細胞～支持細胞に分化しつつある細胞～特定のサブタイプの支持細胞の任意の段階で起こすことの出来るマウスを導入した。平成25年度以降にはこのマウスも用いて研究を進める予定である。

这项研究的对象是哺乳动物的耳蜗，所有实验均使用小鼠进行。为了阐明耳蜗感觉上皮发育的分子机制，我们首先在体内和体外操纵培养的耳蜗中的多个信号转导系统，并研究它们在感觉上皮发育的每个阶段的参与和相互作用。待操纵的信号转导系统是Notch信号转导系统、Hedgehog信号转导系统、FGF信号转导系统和TGFβ/BMP信号转导系统或条件性敲除小鼠或缺陷或过度表达的小鼠。条件持续表达小鼠，②体外培养耳蜗操作：通过电穿孔将信号转导系统相关基因过表达的质粒载体导入培养耳蜗，③体外培养耳蜗操作：培养基并添加促进或促进信号转导系统相关基因的药物或蛋白质。抑制信号转导。 2012年度，我们使用感觉上皮祖细胞发生基因重组的小鼠，研究了耳蜗感觉上皮发育过程中从感觉上皮祖细胞分化为毛细胞和支持细胞阶段的Notch信号转导系统。 Hedgehog信号系统、Hedgehog信号系统和FG信号系统F、Notch信号系统和FGF信号系统、Notch信号系统和TGFβ/BMP信号系统。其中，Notch信号系统与Hedgehog信号系统结合、Hedgehog信号系统与FGF信号系统结合所获得的成果正在论文中总结并提交。我们还引入了药物诱导的基因重组可以发生在从感觉上皮祖细胞到分化为支持细胞到特定亚型支持细胞的细胞的任何阶段的小鼠。我们计划从 2013 年开始使用这款鼠标进行研究。