腫瘍随伴マクロファージの新規マーカーの同定と口腔扁平上皮癌の分子標的治療への応用

副肿瘤巨噬细胞新标志物的鉴定及其在口腔鳞癌分子靶向治疗中的应用

• 批准号: 22K21042
• 负责人: 甲斐 一希
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K21042/
• 关键词: 腫瘍随伴マクロファージ; TAM; がん微小環境; 口腔扁平上皮癌; scRNA-seq; 腫瘍微小環境

近年、がん周囲組織に特異的なマクロファージが存在することが報告されており、それを腫瘍随伴マクロファージ(TAM)と言われている。われわれは口腔扁平上皮癌(OSCC) において、TAMがIL-10やPD-L1を産生することにより、T細胞の働きを抑制することや、EGFを介して OSCCの増殖にも関与していることを明らかにした。つまり、がんの治療予後を良好なものにするためには、TAMを制御することが重要である。そのためには、未だ明らかにされていないTAMの分化機構や特異的マーカーを同定することが必要不可欠である。そこで本研究では、OSCC組織を用いて scRNA-seq解析を行い、OSCCにおけるにおけるTAMサブセットを同定することを目的とする。さらに、各サブセットを抽出して、in vitroにて機能解析を行うことにより、TAMを標的とした新たな治療法の開発を最終目標とする。がん微小環境における免疫細胞の解析を行う上で、採取する組織は間質細胞が豊富なほうが免疫細胞の採取がしやすいものと考えられ、口腔内においては舌組織が適当であると考えられた。また本研究での対象細胞はマクロファージであるが、組織中のマクロファージは数はそこまで多くなく、マクロファージのみを抽出して解析を行うと、作業工程でのエラーが生じる可能性が高くなるため、今回は免疫細胞全体を対象に解析を行うこととした。ヒト舌OSCC組織の一部組織を採取し、細胞を単離した。その後マグネットビーズを用いてCD45陽性免疫細胞のみを抽出し、scRNA-seq解析を行った。

近年来，有报道称癌症周围组织中存在特定的巨噬细胞，这些巨噬细胞被称为肿瘤相关巨噬细胞（TAM）。我们发现，在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中，TAM 通过产生 IL-10 和 PD-L1 来抑制 T 细胞的功能，并通过 EGF 参与 OSCC 的增殖。换句话说，控制TAM对于改善癌症治疗的预后非常重要。为此，有必要确定TAM的分化机制和特异性标志物，但目前尚未阐明。因此，在本研究中，我们使用 OSCC 组织进行 scRNA-seq 分析，旨在识别 OSCC 中的 TAM 子集。此外，通过提取每个子集并进行体外功能分析，最终目标是开发针对TAM的新治疗方法。在分析癌症微环境中的免疫细胞时，人们认为从富含基质细胞的组织中收集免疫细胞更容易，而舌组织被认为适合口腔。另外，虽然本次研究的目标细胞是巨噬细胞，但组织中的巨噬细胞数量并不多，如果只提取巨噬细胞进行分析，那么在工作过程中很有可能会出现错误。我们决定针对所有免疫细胞进行分析。收集一部分人舌 OSCC 组织并分离细胞。然后，使用磁珠仅提取CD45阳性免疫细胞并进行scRNA-seq分析。