AQP1を起点とする妊娠高血圧症候群における胎盤機能不全の理解と治療戦略の創出

了解 AQP1 引起的妊娠高血压综合征中的胎盘功能不全并制定治疗策略

基本信息

批准号：
22K20957
负责人：
室井慎一
金额：
$ 1.83万
依托单位：
University of Toyama
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-08-31 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

妊娠高血圧症候群 (HDP) は周産期に生じる疾患の中で最も頻度が高いにも関わらず，効果的な治療が存在しない．申請者は，HDPモデルマウスであるPAHマウスの妊娠19日目の胎盤をサンプルとしたトランスクリプトーム解析の結果から，水チャネルであるAQP1の遺伝子発現がPAHマウス胎盤で減少していることを見出している．本研究では，AQP1の発現減少を実際に確認すること，その減少の意義およびその原因の解明，さらにはその減少を抑制可能な和漢薬の探索を行うことを目的とする．本年度は，まず正常妊娠マウスおよびPAHマウスの発症前，発症後および出産直前のそれぞれ妊娠13,16および19日目の胎盤サンプルを用いて，AQP1のｍRNA発現およびタンパク質量を解析した．妊娠16日目および19日目の胎盤においてAQP1のmRNA発現およびタンパク質量は著明に減少していた．この結果から，トランスクリプトーム解析の結果が実際に検証され，その減少は妊娠高血圧症候群の病態進行に伴って生じていることが示唆された．正常妊娠マウスおよびPAHマウスの妊娠19日目の胎盤をサンプルとしたトランスクリプトーム解析の結果からは，AQP1の発現減少に関わる炎症などに関する遺伝子群は抽出されなかった．しかしながら，qPCRにて炎症性サイトカインのmRNA発現を解析すると，わずかではあるがPAHマウス胎盤において上昇傾向にあった．さらに，AQP1発現減少を改善できるような和漢薬の探索として，マウスアンジオテンシンAT1受容体安定発現HEK293細胞に和漢薬を10 ug/mlで24時間前処理後にアンジオテンシンIIを15分間処理し，細胞溶解液中のERKのリン酸化レベルを評価することでアンジオテンシンIIによる受容体活性を評価した．その結果いくつかの和漢薬に抑制効果が認められた．

妊娠期高血压综合征（HDP）是最常见的围产期疾病，但尚无有效的治疗方法。申请人根据对妊娠第19天的HDP模型小鼠PAH小鼠的胎盘样本进行转录组分析的结果，发现PAH小鼠胎盘中水通道AQP1的基因表达降低。。本研究的目的是实际确认AQP1表达的降低，阐明其降低的意义和原因，并寻找可以抑制这种降低的日药和中药。今年，我们首先使用正常妊娠小鼠和 PAH 小鼠在妊娠第 13、16 和 19 天、症状出现前、症状出现后和出生前的胎盘样本分析了 AQP1 的 mRNA 表达和蛋白水平，分别。妊娠第 16 天和第 19 天胎盘中 AQP1 mRNA 表达和蛋白水平显着降低。这些结果实际上验证了转录组分析的结果，并表明随着妊娠高血压综合征的病理进展，这种减少会发生。使用正常妊娠小鼠和妊娠第19天PAH小鼠的胎盘样本进行转录组分析，结果未发现与AQP1表达下降相关的炎症等相关基因组。然而，使用 qPCR 对炎症细胞因子 mRNA 表达的分析显示，PAH 小鼠胎盘中炎症细胞因子的 mRNA 表达有增加的趋势，尽管略有增加。此外，为了寻找能够改善AQP1表达下降的日药和中药，将稳定表达小鼠血管紧张素AT1受体的HEK293细胞用10ug/ml的日药和中药预处理24小时，然后用血管紧张素II处理24小时。 15分钟，细胞裂解物用血管紧张素II处理15分钟。通过评价受体中ERK的磷酸化水平来评价血管紧张素II诱导的受体活性。结果发现，一些日药和中药具有抑制作用。