Development of B-cell targeted chimeric antigen receptor-T cells for the treatment of SLE

开发用于治疗 SLE 的 B 细胞靶向嵌合抗原受体 T 细胞

• 批准号: 22K20863
• 负责人: 久保 裕
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20863/
• 关键词: 全身性エリテマトーデス; キメラ抗原受容体; CAR-T細胞; BAFF; BLyS; B細胞; リウマチ性疾患; 全身性エリテマトーデス(SLE); BAFF/BLyS

本研究では、SLEの自己免疫異常においてB細胞が中心的な役割を果たすとの考えのもと、SLEにおいてB細胞の制御を目的とした新しい根治療法の開発が目的である。腫瘍モデルで有効性が証明されているBAFF/BLySの受容体(BAFF-R、BCMA、TACI)を標的としたリガンド型のCAR-T細胞を作成、SLEモデルマウスに投与し、症状・検査所見、抗体産生能などに与える影響を評価する。具体的には、まず、1.BAFF キメラ抗原受容体発現T細胞(BAFF CAR-T細胞)をコンストラクトから作成する。次に、2.作成したBAFF CAR-T細胞を、全身性エリテマトーデス(SLE)のモデルマウスとなるB6 SKGマウスに投与する。最後に3.マウス内でのBAFF CAR-T細胞の動態、治療効果を評価することを目的としている。本年度は主に、1.の予備実験として、マウスの脾臓から細胞を採取して、磁気細胞分離キットを用いてCD8T細胞を分離した。CD8T細胞をサイトカインで刺激後に、CD19CAR DNAをレトロネクチンを用いてトランスフェクションさせ、CD19 CAR-T細胞を作成した。また、2.のB6 SKGマウスと背景が異なるBALB/c SKGマウスにおいて、β-Glucanを投与して関節炎などの表現型が誘発できることを確認した。さらに、β-Glucanの投与量の違いによる関節炎臨床スコアの違いについても検討した。今後はBAFF CAR-T細胞の作成、B6 SKGマウスへの投与を行う予定である。

这项研究旨在开发一种旨在控制SLE中B细胞的新的根疗法，基于B细胞在SLE自身免疫异常中起核心作用的想法。评估已证明在肿瘤模型中有效的配体型CAR-T细胞（BAFF-R，BCMA，TACI），对SLE模型小鼠产生有效，并评估其对症状，实验室发现，抗体生产能力等的影响。具体而言，首先是1。BAFF嵌合抗原受体表达T细胞（BAFF CAR-T细胞）是由构造产生的。接下来，2。生成的BAFF CAR-T细胞被给予B6 SKG小鼠，这是一种用于全身性红斑狼疮的模型小鼠（SLE）。最后，目的是评估BAFF CAR-T细胞在小鼠中的动力学和治疗功效。今年，作为1.中的初步实验，使用磁细胞分离试剂盒分离从小鼠和CD8T细胞的脾脏收集细胞。用细胞因子刺激CD8T细胞，然后用反元蛋白转染CD19CAR DNA，以产生CD19 CAR-T细胞。此外，已经证实，在BALB/C SKG小鼠中，可以诱导β-葡聚糖与2（2中的B6 SKG小鼠）不同，以诱导关节炎和其他表型。此外，还检查了由于β-葡聚糖剂量差异而导致的关节炎临床评分差异。将来，将生产Baff CAR-T细胞并给予B6 SKG小鼠。

项目成果

「全身性エリテマトーデスにおけるB細胞を標的としたCAR-T細胞療法の開発」について

关于“针对系统性红斑狼疮 B 细胞的 CAR-T 细胞疗法的开发”

• 发表时间: 2023
• 期刊: アレルギーの臨床
• 作者: 芦崎太一朗;十河正弥;宇田有希;木村正夢嶺;的場健人;古東秀介;千原典夫;関口兼司;松本理器;久保裕
• 通讯作者: 久保裕