Development of B-cell targeted chimeric antigen receptor-T cells for the treatment of SLE

开发用于治疗 SLE 的 B 细胞靶向嵌合抗原受体 T 细胞

• 批准号: 22K20863
• 负责人: 久保 裕
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20863/
• 关键词: 全身性エリテマトーデス; キメラ抗原受容体; CAR-T細胞; BAFF; BLyS; B細胞; リウマチ性疾患; 全身性エリテマトーデス(SLE); BAFF/BLyS

本研究では、SLEの自己免疫異常においてB細胞が中心的な役割を果たすとの考えのもと、SLEにおいてB細胞の制御を目的とした新しい根治療法の開発が目的である。腫瘍モデルで有効性が証明されているBAFF/BLySの受容体(BAFF-R、BCMA、TACI)を標的としたリガンド型のCAR-T細胞を作成、SLEモデルマウスに投与し、症状・検査所見、抗体産生能などに与える影響を評価する。具体的には、まず、1.BAFF キメラ抗原受容体発現T細胞(BAFF CAR-T細胞)をコンストラクトから作成する。次に、2.作成したBAFF CAR-T細胞を、全身性エリテマトーデス(SLE)のモデルマウスとなるB6 SKGマウスに投与する。最後に3.マウス内でのBAFF CAR-T細胞の動態、治療効果を評価することを目的としている。本年度は主に、1.の予備実験として、マウスの脾臓から細胞を採取して、磁気細胞分離キットを用いてCD8T細胞を分離した。CD8T細胞をサイトカインで刺激後に、CD19CAR DNAをレトロネクチンを用いてトランスフェクションさせ、CD19 CAR-T細胞を作成した。また、2.のB6 SKGマウスと背景が異なるBALB/c SKGマウスにおいて、β-Glucanを投与して関節炎などの表現型が誘発できることを確認した。さらに、β-Glucanの投与量の違いによる関節炎臨床スコアの違いについても検討した。今後はBAFF CAR-T細胞の作成、B6 SKGマウスへの投与を行う予定である。

基于B细胞在SLE自身免疫异常中发挥核心作用的观点，本研究的目的是开发一种新的根治性治疗方法来控制SLE中的B细胞。已证明在肿瘤模型中有效的针对 BAFF/BLyS 受体（BAFF-R、BCMA、TACI）的配体型 CAR-T 细胞被创建并给予 SLE 模型小鼠，并确定、评估症状和实验室结果。对抗体产生能力的影响等具体而言，首先，1.由构建体产生表达BAFF嵌合抗原受体的T细胞(BAFF CAR-T细胞)。接下来，2. 将创建的 BAFF CAR-T 细胞给予 B6 SKG 小鼠，作为系统性红斑狼疮 (SLE) 的模型小鼠。最后，3.我们的目标是评估BAFF CAR-T细胞在小鼠体内的动态及其治疗效果。今年，作为步骤 1 的初步实验，我们从小鼠脾脏中收集细胞，并使用磁性细胞分离试剂盒分离 CD8T 细胞。用细胞因子刺激CD8T细胞后，使用retronectin转染CD19CAR DNA以产生CD19 CAR-T细胞。我们还证实，给予 β-葡聚糖可以在 BALB/c SKG 小鼠中诱导关节炎等表型，该小鼠与 2 中描述的 B6 SKG 小鼠具有不同的背景。此外，我们还检查了由于β-葡聚糖剂量的不同而导致的临床关节炎评分的差异。未来，我们计划生成 BAFF CAR-T 细胞并将其施用给 B6 SKG 小鼠。

项目成果

「全身性エリテマトーデスにおけるB細胞を標的としたCAR-T細胞療法の開発」について

关于“针对系统性红斑狼疮 B 细胞的 CAR-T 细胞疗法的开发”

• 发表时间: 2023
• 期刊: アレルギーの臨床
• 作者: 芦崎太一朗;十河正弥;宇田有希;木村正夢嶺;的場健人;古東秀介;千原典夫;関口兼司;松本理器;久保裕
• 通讯作者: 久保裕