血中循環腫瘍細胞におけるDNA脱メチル化異常と膵癌悪性度の研究

循环肿瘤细胞DNA异常去甲基化与胰腺癌恶性肿瘤的研究

• 批准号: 22K20835
• 负责人: 遠藤 裕平
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20835/
• 关键词: 膵癌; DNA脱メチル化異常; 循環腫瘍細胞; 循環腫瘍DNA; DNAメチル化; 染色体不安定性

これまで、当教室ではエピゲノム異常と染色体不安定性、発癌という一連の経路に着目し、遺伝子異常、遺伝子修飾異常をゲノム全域に渡って包括的に解析してきた。ゲノム全域に広がる反復配列の異常低メチル化に目を向け、段階的に進むDNA脱メチル化異常が胃癌、大腸癌の発癌過程に深く関わっている事を示した。また、DNA脱メチル化異常と染色体不安定性、転移との関係に着目し、膵癌細胞に異常低メチル化を導入することで染色体不安定性を誘導することに成功し、その結果、これらの細胞は浸潤性の高い表現型に変化することを実験で明らかにした。さらに、臨床検体を用いた検討で、異常低メチル化の程度が膵癌患者のoccult metastasisの有無、及び生存期間を予測するバイオマーカーになりうることを明らかにした。一方、当研究室では、腫瘍のゲノムプロファイルの進展・転移、治療の過程における変化を捉えるために、各種癌種における循環遊離DNAに注目し血中モニタリングを行ってきた。これまでに食道癌、胃癌、膵癌、胆道癌、小腸癌、大腸癌、乳癌の術前及び化学療法を行った患者の血漿検体を収集し、デジタルPCRを用いてKRAS血中モニタリングを行ってきた。大腸癌では治療効果判定のみならず、感受性回復を示す薬剤の再導入の指標としての臨床的意義を明らかにした。さらに原発巣と転移巣のKRAS statusの解離に注目し、KRAS statusに基づく新たな治療介入方法（転移巣は切除し原発巣は化学療法など）の可能性を示した。膵癌では、手術群、非手術群の両群においてモニタリング中の循環腫瘍DNA出現は予後不良因子になることを明らかにした。現在、更なるゲノムプロファイリングの質的向上のため血中循環腫瘍細胞(CTC)を利用した検討を行っている。

截至目前，我科重点关注表观基因组异常、染色体不稳定性、癌变等一系列通路，全面分析全基因组的遗传异常和基因修饰异常。通过关注遍布整个基因组的重复序列的异常低甲基化，我们发现逐步的DNA去甲基化异常深深参与了胃癌和结直肠癌的癌变过程。此外，关注异常DNA去甲基化、染色体不稳定和转移之间的关系，我们通过将异常低甲基化引入胰腺癌细胞中，成功诱导了染色体不稳定，结果，这些细胞的实验揭示了表型转变为高度侵袭性的细胞。一。此外，使用临床标本的研究表明，异常低甲基化的程度可以作为预测胰腺癌患者是否存在隐匿性转移和生存时间的生物标志物。同时，在我们的实验室，我们一直在监测各种癌症类型中的循环游离DNA，以了解肿瘤基因组谱的发展和转移变化以及治疗过程。迄今为止，我们已经收集了食道癌、胃癌、胰腺癌、胆道癌、小肠癌、结肠癌和乳腺癌接受术前或化疗治疗的患者的血浆样本，并使用数字PCR进行了KRAS血液监测.对于结直肠癌，我们阐明了其临床意义，不仅可以确定治疗效果，还可以作为重新引入药物敏感性恢复的指标。此外，我们重点关注原发灶和转移灶之间KRAS状态的分离，并论证了基于KRAS状态的新治疗干预方法（例如转移灶切除和原发灶化疗）的可能性。在胰腺癌中，监测过程中循环肿瘤 DNA 的出现被发现是手术组和非手术组的不良预后因素。我们目前正在研究使用循环肿瘤细胞 (CTC) 来进一步提高基因组分析的质量。

项目成果

Genome-wide DNA hypomethylation drives a more invasive pancreatic cancer phenotype and has predictive occult distant metastasis and prognosis potential

• DOI: 10.3892/ijo.2022.5351
• 发表时间: 2022-04
• 期刊: International Journal of Oncology
• 影响因子: 5.2
• 作者: Y. Endo;Koichi Suzuki;Yasuaki Kimura;Sawako Tamaki;Hidetoshi Aizawa;I. Abe;F. Watanabe;Takaharu Kato;Masaaki Saito;K. Futsuhara;H. Noda;F. Konishi;T. Rikiyama