コカイン依存が長期化するメカニズムの解明： Egr1に着目して

阐明长期可卡因依赖的机制：关注 Egr1

• 批准号: 22K20749
• 负责人: 中村 有香里
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20749/
• 关键词: コカイン; 側坐核; Egr1; 依存症; DREADD

コカインなどの依存性薬物は少数のニューロンを同時に活性化し、その結びつきを病的に強めることで長期の依存性をもたらすと考えられているが、実際に脳内のどの部位の、どのような神経細胞が活性化されるのかはわかっていない。本研究では、マウスにおける薬物依存の長期化現象(コカイン感作、コカイン条件付け場所嗜好性)における線条体の各脳神経細胞の細胞型(D1ニューロン、D2ニューロン)や活性化細胞の役割を検討した。活性化細胞のマーカーとしてEgr1を用いた。まず、コカイン条件付け場所嗜好性テスト(コカインCPP)における線条体各細胞型(D1ニューロン、D2ニューロン)の機能を明らかにするために、2種類の遺伝子改変マウス(D1Cre x R26-LSL-Gi-DREADD、A2ACre x R26-LSL-Gi-DREADD)を用いて、コカイン投与時にD1もしくはD2ニューロンの活動性を抑制した時、コカインCPPが阻害されるかどうか検討をおこなった。その結果、D1もしくはD2ニューロンのどちらの活動性を抑制した場合にもコカインCPPの形成が阻害された。以上の結果から、D1ニューロンとD2ニューロン、それぞれのニューロンの活性化がともにコカインCPPの形成に必要であることが示唆された。今後は、脳のどの領域のD1ニューロンとD2ニューロンがコカインCPPの形成に重要なのか解析するため、特定の細胞型にCreを発現する遺伝子改変マウス(D1Cre mice, D2Cre mice)に、Cre依存的に抑制型DREADDを発現するAAVを各脳部位に注入し、DREADD発現細胞の活動性を抑制したときのマウスの行動を解析していく。

人们认为，可卡因等成瘾药物会同时激活少量神经元，并病理性地加强它们之间的连接，从而导致长期依赖。目前尚不清楚细胞是否被激活。在这项研究中，我们研究了纹状体中每种神经元细胞类型（D1神经元、D2神经元）和激活细胞在小鼠长期药物依赖现象（可卡因致敏、可卡因条件性位置偏好）中的作用。 Egr1 被用作活化细胞的标记。首先，为了阐明可卡因条件位置偏好测试（可卡因CPP）中每种纹状体细胞类型（D1神经元、D2神经元）的功能，两种类型的转基因小鼠（D1Cre x R26-LSL-Gi-DREADD、A2ACre x R26-LSL-Gi-DREADD)用于检查当可卡因给药期间D1或D2神经元的活性被抑制时，可卡因CPP是否被抑制。结果，当 D1 或 D2 神经元的活性受到抑制时，可卡因 CPP 的形成就会受到抑制。这些结果表明 D1 和 D2 神经元的激活对于可卡因 CPP 的形成是必要的。未来，为了分析哪些脑区D1和D2神经元对于可卡因CPP的形成很重要，我们将进行在特定细胞类型中表达Cre的转基因小鼠（D1Cre小鼠、D2Cre小鼠），我们将注射表达AAV。将抑制性 DREADD 植入每个大脑区域，并分析当表达 DREADD 的细胞的活动受到抑制时小鼠的行为。