5-ALA、リピッドバブルおよび低強度超音波を併用した音響力学療法に関する基礎的検討

5-ALA、脂质泡和低强度超声声动力疗法的基础研究

• 批准号: 22K20615
• 负责人: 横江 祈
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20615/
• 关键词: 予備実験; 実験条件の設定; 超音波; 音響力学療法; 5-ALA; リピッドバブル

超音波と5-アミノレブリン酸(5-Amino levulinic acid: 5-ALA)の併用による音響力学療法(Sonodynamic therapy: SDT)は、がんに対する 局所療法として注目されている。申請者は、マイクロバブル製剤であるリピッドバブル(Lipid bubbles: LBs)、5-ALAおよび低強度超音波(Low-intensity ultrasound: LIUS)を併用することにより、有効性の高いSDTを開発することを着想した。本研究では、5-ALA、LBsおよびLIUSを併用したSDT（5-ALA-LBs-SDT）の抗腫瘍効果に関する基礎的検討を実施した。令和4年度では、1) マウス乳癌細胞株であるEMT-6に5-ALAを添加し、蛍光顕微鏡を用いて観察したところ、代謝産物であるPpⅨの蓄積が確認された。2) また、腫瘍細胞に対する5-ALA-LBs-SDTの殺細胞効果の評価系を確立するために、種々の実験条件にて予備実験を実施した。初めは、プレート底面からの超音波照射を行っていたが、超音波散乱の影響か再現性のある実験結果が得られなかった。そのため、プレートの蓋を外し、液面に直接プローブを接触させて超音波照射をする方法に切り替えた。また、12wellプレート、24wellプレート、48wellプレート、96wellプレートを用いて実験を行ったが、48wellプレートよりウェル径が大きいプレートでは、ウェルの辺縁の細胞に超音波が均一に照射されておらず、実験結果にばらつきが生じやすくなった。そのため、96wellプレートを用いて実験を実施した。その結果、安定的な実験結果を得られることが明らかとなったため、以降は上記の方法にて予備実験を実施した。予備実験の結果、適切な実験条件の目安が付いたため、今後はこれらの予備実験の結果を基に本実験を遂行する。

使用超声和5-氨基葡萄蛋白酸（5-ALA）的声动力疗法（SDT）吸引了作为癌症的局部疗法的关注。申请人通过结合Microbubbles配方脂质气泡（LBS），5-ALA和低强度超声（LIUS）来考虑高效的SDT的发展。在这项研究中，我们使用5-ALA，LBS和LIU进行了有关SDT（5-ALA-LBS-SDT）抗肿瘤作用的基础研究。在2022年，将1）5-ALA添加到EMT-6（小鼠乳腺癌细胞系）中，并使用荧光显微镜观察，并确认了代谢物PPⅸ的积累。 2）此外，为了建立一个用于评估5-ALA-LBS-SDT对肿瘤细胞的细胞杀伤作用的系统，在各种实验条件下进行了初步实验。最初，从板的底部进行了超声辐射，但没有获得可重现的实验结果，这可能是由于超声散射的影响。因此，该方法被切换以去除板的盖子，并直接与液体表面接触以提供超声辐射。此外，使用12孔板，24孔板，48孔板和96孔板进行实验，但是在直径较大的板中，超过48孔板，超声波的超声波并不均匀地辐照到孔的边缘上的细胞，从而使实验性的结果易于变化。因此，使用96井板进行了实验。结果，可以揭示可以获得稳定的实验结果，随后，使用上述方法进行了初步实验。由于初步实验，提供了适当的实验条件，将来将根据这些初步实验的结果进行此实验。