Developing an in vitro system for human spermatogenesis

开发人类精子发生的体外系统

• 批准号: 22H00485
• 负责人: 小川 毅彦
• 金额: $ 26.79万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H00485/
• 关键词: 精子形成; 器官培養; 男性不妊症; ヒト組織

試験管内ヒト精子形成法の完成を目指して研究を開始した。まず培養精巣組織に生じる創傷治癒現象である高度の線維化（硬丸化）の制御を目指して、各種、薬剤（抗線維化薬、抗炎症薬、抗酸化剤、等）を培養液に加えてヒト精巣組織を培養し、硬丸化を抑制する薬剤・試薬を探索しているが、未だに有効な対策は開発できていない。改めて創傷治癒現象の頑固さを実感している。一方、マウスの単離精細管の培養は一定の成果を得て、単離精細管でも精子形成誘導できることを確認し、論文発表した。また、培養液組成の根本的改良を目指し、基礎培地の検討に立ち戻っての検討を開始した。近年Human plasma like mediumというヒト血清に近似した基礎培地が市販されており、これを用いた実験も開始した。また共同研究者とマウスの血清に近似した基礎培地を作成し、培養実験に供している。これまでのマウス精巣組織培養での経験から、基礎培地の組成が精子形成効率に大きく影響することが分かっており、ヒト精子形成に適した培地作りに今後応用していく。2年目以降に予定していた未成熟サル精巣組織培養実験を、カニクイザル精巣組織（３歳８か月齢）を用いて開始した。この精巣組織では精子形成は開始しておらず、培養下で精巣の成熟と精子形成の誘導を、培養液にホルモン等を添加して検討しているが、生殖細胞の減少を認め、適切な培養条件の発見には至っていない。引き続き、様々な角度から培養条件を検討していく。

研究已经开始，旨在完成体外人类精子发生方法。首先，将各种药物（抗纤维化药物、抗炎药物、抗氧化剂等）添加到培养基中，目的是控制晚期纤维化（硬圆化），这是培养的人类睾丸组织中发生的伤口愈合现象。人们正在培养睾丸组织以寻找可以抑制硬圆的药物和试剂，但尚未开发出有效的对策。我再次认识到伤口愈合现象的顽固性。另一方面，小鼠离体生精小管的培养取得了一定的成果，我们证实了离体生精小管可以诱导精子发生，并发表了论文。此外，为了从根本上改善培养基的成分，我们已经开始重新审视基础培养基。近年来，一种类似于人血清的基础培养基，称为人血浆样培养基已经上市，我们已经开始使用它进行实验。此外，他和他的合作者还创建了一种类似于小鼠血清的基础培养基，并将其用于培养实验。根据我们对小鼠睾丸组织培养的经验，我们知道基础培养基的成分对精子发生效率有很大影响，未来我们将应用它来创建适合人类精子发生的培养基。计划从第二年开始进行的未成熟猴睾丸组织培养实验，使用食蟹猴睾丸组织（3岁零8个月）开始。该睾丸组织尚未开始精子发生，我们正在通过在培养基中添加激素等来研究睾丸的成熟和在培养中诱导精子发生，但我们观察到生殖细胞减少，并且适当的培养条件尚未被发现。我们将继续从各个角度审视文化状况。

项目成果

精巣体細胞様細胞の製造方法

睾丸体细胞样细胞的制备方法

• 发表时间: 2022

教育講演「精子幹細胞」

教育讲座“精子干细胞”

• 发表时间: 2022
• 作者: 福田滉仁;熊谷尚悟;西川博嘉;渡辺 守;藤堂具紀;小川毅彦
• 通讯作者: 小川毅彦

「In vitro 精子形成による精巣毒性評価」

“通过体外精子发生评估睾丸毒性”

• 发表时间: 2022
• 作者: Yamada T;Tateishi R;Iwai M;Tanaka M;Ijichi H;Sano M;Koike K;Todo T;小川毅彦
• 通讯作者: 小川毅彦

“Establishment of in vitro spermatogenesis with high integrity”

“建立高度完整性的体外精子发生”

• 发表时间: 2022
• 作者: 藤本 康介;植松 智;編集：西川博嘉;Takehiko Ogawa
• 通讯作者: Takehiko Ogawa

横浜市立

横滨市