日本産ショウロ「子実体過剰形成株」の分子遺伝学的解析

日本Choro“子实体形成过多品系”的分子遗传分析

• 批准号: 22880017
• 负责人: 泉津 弘佑
• 金额: $ 1.96万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22880017/
• 关键词: ショウロ; 菌根; 子実体; 担子菌; アグロバクテリウム法; エノキタケ; 遺伝子組換え; ショウロ; 菌根; 子実体; 担子菌; アグロバクテリウム法; エノキタケ; 遺伝子組換え

マツタケやショウロをはじめとする菌根菌類は,一般的に人口栽培が極めてむずかしく,菌根共生無しには,子実体形成ができないのではないかと考えられている。本研究では,培地上でも子実体を形成する特殊な日本産ショウロの菌株に着目した。日本産ショウロの子実体過剰形成株Rr6f株は,寒天培地上で子実体を形成し,担子胞子の分離が可能であった。担子胞子分離株は,野生株と形態に大きな差異が認められるものと,認められないものに分かれる傾向が見られた。初年度は,まず,形態に大きな差異の認められない子孫株同士の交配試験および子実体形成試験を試みた。その結果,交配により生じたと考えられるクランプは認められたものの,子実体形成は一切認められなかった。以上のことから,子実体過剰形成の形質は,野生株と生育に差異が認められる担子胞子に遺伝しているものと示唆された。また、本年度は,ショウロに対する遺伝子導入系の開発も試みた。遺伝子導入系のポジティブコントロールとしては,腐生性のエノキタケを用いた。手法は菌類の遺伝子組換えに一般的に用いられるプロトプラストPEG法およびアグロバクテリウム法を用いた。エノキタケについては,両手法でハイグロマイシン耐性遺伝子の導入に成功したが,ショウロでは変異株は得られなかった。本年度は,ハイグロマイシン耐性遺伝子のプロモータとして担子菌類Cryptococcus neoformansのActin遺伝子のプロモータを用いたが,これを日本産ショウロのネイティブなプロモータに差し替える必要があると考えられた。

菌根真菌，包括哑光蘑菇和shirou，通常在人群中生长极其困难，人们认为没有菌根共生的情况就无法形成果实。在这项研究中，我们专注于一种特殊的日本糖浆，该糖浆还形成了培养基上的结果。在琼脂培养基上形成了日本海岸线的果体过多形成菌株RR6F，从而可以分离基质孢子。亚孢子分离株倾向于将形态学差异较大的人分开，而在梯形分离株中没有差异的分离株。在第一年，我们首先尝试了在形态没有显着差异的后代菌株之间进行交配和果实的身体形成测试。结果，尽管观察到夹具被认为是由交配引起的，但未观察到结实的身体形成。从以上，提出的是，基体的过度产生是由子孢子遗传而来的，这种生长与野生菌株的生长不同。此外，今年我们还试图开发糖浆的基因转移系统。腐生enokitake用作基因转基因系统的阳性对照。所使用的方法是原生质体PEG方法和农杆菌方法，这些方法通常用于真菌的遗传重组。对于Enokitake，两种方法都用于成功引入湿霉素耐药性基因，但是在S.今年，我们没有获得突变菌株，我们使用了基本菌Cryptoccus Neoformans的肌动蛋白基因的启动子作为促进剂的促进剂，以替代该抗性基因，并且它可以替换为日式的启动者。