植物病原菌ゲノミクス手法を用いた殺菌剤作用機構の研究基盤の確立

利用植物病原基因组学方法建立杀菌剂作用机制研究基地

• 批准号: 11J09315
• 负责人: 泉津 弘佑
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: The University of Shiga Prefecture
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J09315/
• 关键词: 薬剤耐性; 植物病原菌; ゲノムシークエンス; 農薬

本年度は、昨年度までに得られていたトウモロコシごま葉枯病菌(Cochliobolus heterostrophus)の各種化学突然変異株の戻し交配を引き続き行った。具体的には、重要な薬剤耐性株(TF991耐性株)を含む化学突然変異株群について、野生株との戻し交配を6-7回行った後、相互交配により多重変異株を作出した。次に、3重変異株2-7-a、4重変異株57a、および野生株のゲノムDNAを抽出し、全ゲノムシークエンス解析を行った。すでに全ゲノム配列が公開されているC5株をリファレンス配列として用いて、それぞれの変異点の位置について比較、解析を行った。その結果、薬剤耐性に関わる可能性のある変異点を、いずれの多重変異株においても約300-500箇所に絞ることに成功した。このうち多くの変異点は、遺伝子コード領域外のものであり、実際に薬剤耐性に関与するものは数十遺伝子に限定されたと言える。今後はこの数十遺伝子から目的遺伝子座を同定するのみとなっている。今後は、まず変異位置に特異的なプライマーを用いたPCRにより、子孫株の解析を通じて候補遺伝子の絞込みを行う予定である。これにより、植物病原菌ゲノミクス手法を用いた薬剤耐性点の初めての同定が可能になると強く期待できる。また、ウリ類炭疸病菌のミトコンドリアにおける脂肪酸β酸化に関わる遺伝子CoEch1の機能解析や、トウモロコシごま葉枯病菌の病原性に関わる遺伝子ChSte12、ChSte50など植物病理学上重要な遺伝子の同定も行った。

今年，我们继续对去年获得的玉米芝麻叶枯病菌（Cochliobolus heterostropus）的各种化学突变株进行回交。具体来说，将一组化学突变菌株，包括重要的耐药菌株（TF991抗性菌株）与野生菌株回交6-7次，然后通过互交产生多个突变菌株。接下来，提取三重突变株2-7-a、四重突变株57a和野生株的基因组DNA，并进行全基因组序列分析。我们以已公开的C5菌株全基因组序列为参考序列，对各个突变点的位置进行了比较分析。结果，他们成功地将多个突变菌株中可能与耐药性相关的突变点缩小到大约 300-500 个。这些突变点很多都在基因编码区之外，可以说，真正参与耐药性的也仅限于几十个基因。今后，我们只能从这几十个基因中识别出目标基因位点。将来，我们计划首先使用针对突变位置的引物，通过 PCR 分析后代菌株来缩小候选基因的范围。人们高度期待这将能够首次利用植物病原体基因组学技术鉴定耐药点。我们还对参与葫芦炭疽真菌线粒体脂肪酸β-氧化的基因CoEch1进行了功能分析，并鉴定了在植物病理学中重要的基因，例如参与植物病理学的基因ChSte12和ChSte50。玉米芝麻叶枯病真菌的毒力。

项目成果

トウモロコシごま葉枯病菌(Cochliobolus heterostrophus)のNADPH Oxidase遺伝子群の機能解析

异旋旋孢菌 NADPH 氧化酶基因的功能分析

• 发表时间: 2011
• 作者: Saitoh Y;Izumitsu K;Morita A;Shimizu K;Tanaka C;泉津弘佑;泉津弘佑;泉津弘佑・森田篤・住田卓也・羽當加奈子・鈴木一実・田中千尋;泉津弘佑・吉見啓・森田篤・齋藤禎一・鈴木一実・田中千尋;泉津弘佑・齋藤禎一・住田卓也・森田篤・田中千尋
• 通讯作者: 泉津弘佑・齋藤禎一・住田卓也・森田篤・田中千尋

トウモロコシごま葉枯病菌(Cochliobolus heterostrophus)のフェニルピロール剤およびダイカルボキシイミド剤耐性遺伝子座Dic2およびDic3は,HOG経路と独立に機能する

异旋旋孢菌的苯基吡咯和二甲酰亚胺抗性位点 Dic2 和 Dic3 功能独立于 HOG 途径

• 发表时间: 2011
• 作者: Saitoh Y;Izumitsu K;Morita A;Shimizu K;Tanaka C;泉津弘佑;泉津弘佑;泉津弘佑・森田篤・住田卓也・羽當加奈子・鈴木一実・田中千尋;泉津弘佑・吉見啓・森田篤・齋藤禎一・鈴木一実・田中千尋
• 通讯作者: 泉津弘佑・吉見啓・森田篤・齋藤禎一・鈴木一実・田中千尋

Transformation of the mushroom species Hypsizigus marmoreus, Flammulina velutipes, and Grifola frondosa by an Agrobacterium-mediated method using a universal transformation plasmid

使用通用转化质粒通过农杆菌介导方法转化蘑菇品种真姬菇、金针菇和灰树花

• DOI: 10.1016/j.myc.2012.08.002
• 发表时间: 2013
• 期刊: Mycoscience
• 影响因子: 1.4
• 作者: K. Hatoh;K. Izumitsu;A. Morita;K. Shimizu;A. Ohta;M. Kawai;T. Yamanaka;H. Neda;Y. Ota;C. Tanaka
• 通讯作者: C. Tanaka

植物病原糸状菌の細胞内シグナル伝達機構を撹乱する殺菌剤

一种破坏植物病原真菌细胞内信号转导机制的杀菌剂

• 发表时间: 2012
• 作者: Saitoh Y;Izumitsu K;Morita A;Shimizu K;Tanaka C;泉津弘佑
• 通讯作者: 泉津弘佑

Molecular organization of the mating type (Mat) locus of Exserohilum monoceras (Setosphaeria monoceras), a bioherbicide agent for Echinochloa weeds

稗草生物除草剂 Exserohilum monoceras (Setosphaeria monoceras) 交配型 (Mat) 基因座的分子组织

• DOI: 10.1007/s10267-011-0141-4
• 发表时间: 2012
• 期刊: Mycoscience
• 影响因子: 1.4
• 作者: Morita A;Saitoh Y;Izumitsu K;Tanaka C
• 通讯作者: Tanaka C