ミトコンドリアオートファジーのメカニズム～酵母からヒトまで～

线粒体自噬机制——从酵母到人类——

• 批准号: 21890177
• 负责人: 神吉 智丈
• 金额: $ 1.81万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21890177/
• 关键词: ミトコンドリア; オートファジー; 酵母; マイトファジー

ミトコンドリアオートファジー(マイトファジー)は、傷害を受けたミトコンドリアをオートファジーによって除去する現象で、細胞内のミトコンドリア品質管理の主体であり、細胞にとって非常に重要な現象である。しかしながら、その重要性にも関わらず、これまでマイトファジーの分子機構はほとんど解明されてこなかった。申請者は、これまでに酵母における実験でAtg32、Atg33という2つの新規マイトファジー関連蛋白質を発見している。平成21年度は、Atg32とAtg33のこれまで明らかにされていない詳細な機能解析を目的として実験を行った。まず、Atg32、Atg33に対する特異抗体を作成した。次にAtg33の抗体を用いて、内在性Atg33を免疫沈降し、共沈降してきた蛋白質をLC-MS/MSを使って同定を試みた所、約20種類の蛋白質が同定できた。現在これらの蛋白質のマイトファジーにおける機能を解析している。また、atg33Δ株は、マイトファジー誘導条件により、マイトファジーを抑制する度合いが異なっており、このことからAtg33はミトコンドリアの傷害や老化を分解系の分子に伝える役割があることが考えられた。Atg32に関しては、特異抗体を用いて、マイトファジー誘導前後でのAtg32の発現量の変化、修飾の有無などの解析を行った。また、Atg32、Atg33のヒトホモログを同定する目的で、Blastなどを含む複数の解析を行ったが、どちらの蛋白質のホモログも同定できなかった。

线粒体自噬（mitophagy）是通过自噬清除受损线粒体的现象，对于细胞来说是非常重要的现象，因为它负责细胞内线粒体的质量控制。然而，尽管线粒体自噬很重要，但其分子机制仍然很大程度上未知。目前，申请人通过酵母实验发现了两种新型线粒体自噬相关蛋白Atg32和Atg33。 2009年，我们进行了实验，分析了Atg32和Atg33的详细功能，目前还没有弄清楚。首先，创建了针对 Atg32 和 Atg33 的特异性抗体。接下来，使用Atg33抗体对内源性Atg33进行免疫沉淀，并使用LC-MS/MS对共沉淀的蛋白质进行鉴定，鉴定出约20种蛋白质。我们目前正在分析这些蛋白质在线粒体自噬中的功能。此外，根据线粒体自噬诱导条件的不同，atg33Δ菌株对线粒体自噬的抑制程度也有所不同，这表明Atg33具有将线粒体损伤和衰老传递给降解系统中分子的作用。对于Atg32，我们使用特异性抗体来分析Atg32在线粒体自噬诱导前后表达水平的变化，以及是否存在修饰。此外，为了鉴定 Atg32 和 Atg33 的人类同源物，我们进行了包括 Blast 在内的多种分析，但无法鉴定任一蛋白质的同源物。

项目成果

Yeast mitochondrial autophagy has selective mechanism

酵母线粒体自噬具有选择性机制

• 发表时间: 2009
• 作者: 神吉智丈;et al
• 通讯作者: et al

Nix, a receptor protein for mitophagy in mammals

• DOI: 10.4161/auto.6.3.11420
• 发表时间: 2010-04-01
• 期刊: AUTOPHAGY
• 影响因子: 13.3
• 作者: Kanki, Tomotake

Atg32 is a tag for mitochondria degradation in yeast

• DOI: 10.4161/auto.5.8.9747
• 发表时间: 2009-11-16
• 期刊: AUTOPHAGY
• 影响因子: 13.3
• 作者: Kanki, Tomotake;Klionsky, Daniel J.
• 通讯作者: Klionsky, Daniel J.

Mitochondrial autophagy in yeast occurs through a selective mechanism

酵母中的线粒体自噬通过选择性机制发生

• 发表时间: 2009
• 作者: 神吉智丈;et al
• 通讯作者: et al