匂い情報識別の分子機構

气味信息辨别的分子机制

• 批准号: 19200028
• 负责人: 坂野 仁
• 金额: $ 16.81万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19200028/
• 关键词: 嗅神経細胞; 嗅覚受容体; 軸索投射; 神経活動; 軸索誘導分子; 軸索選別; トランスジェニックマウス; cAMP

本研究課題ではcAMPのシグナル強度によって転写量が変わる軸索投射因子のスクリーニングを行った。我々は嗅覚受容体(odorant receptor: OR)のG蛋白質共役部位であるDRYモチーフをRDY配列に変えた変異型ORを作成した。この様なORを発現する嗅細胞では殆どOR分子からのシグナルが入らない為に軸索投射が行えず、野生型ORを発現する嗅細胞と比較して、遺伝子の転写プロフィールに差の出る事が期待された。これら2種類の嗅細胞からmRNAを調製し、遺伝子の発現パターンをsingle-cell RT-PCRによって比較することにより、軸索投射に関与する遺伝子の探索を行った。その結果Neuropilin-1など、CNGチャンネル非依存的に発現し嗅球上のAP軸に沿った投射を制御するガイダンス分子と、Kirrelやephrir-AなどCNG依存的で軸索選別に関与すると思われる分子を同定した。現在これら分子について、トランスジェニックマウスを用いたgain of functionのモザイク解析を行っている。

在这个研究项目中，我们筛选了转录水平随 cAMP 信号强度而变化的轴突投射因子。我们创建了一个突变体 OR，其中 DRY 基序（气味受体 (OR) 的 G 蛋白偶联位点）被 RDY 序列取代。表达此类 OR 的嗅觉细胞几乎不接收来自 OR 分子的信号，因此无法发生轴突投射，从而导致与表达野生型 OR 的嗅觉细胞相比基因转录谱存在差异。通过从这两种类型的嗅觉细胞中制备 mRNA，并通过单细胞 RT-PCR 比较基因表达模式，我们寻找参与轴突投射的基因。因此，诸如 Neuropilin-1 等引导分子以 CNG 通道独立的方式表达并控制嗅球上沿 AP 轴的投射，以及诸如 Kirrel 和 ephrir-A 等分子，它们依赖于 CNG 并控制嗅球上的 AP 轴的投射。似乎参与轴突排序。我们目前正在使用转基因小鼠对这些分子的功能获得进行镶嵌分析。