ミトコンドリアとリソソームの相互作用における分子メカニズムの解明

阐明线粒体与溶酶体相互作用的分子机制

基本信息

批准号：
15H06520
负责人：
八木沢芙美
金额：
$ 0.92万
依托单位：
University of the Ryukyus
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-08-28 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15H06520/
关键词：
ミトコンドリアリソソーム Cyanidioszhyzon

项目摘要

地球上の多くの生物を構成する真核細胞は、細胞核やミトコンドリア、リソソームなど固有の機能を担う膜で囲まれた細胞小器官、すなわちオルガネラを持つ。オルガネラは異なる種類のものが物理的に相互作用することが知られ、この相互作用が病気や環境応答に関わることが分かってきている。ミトコンドリアは細胞内のエネルギー生産を、リソソームは細胞内の分解を担う重要なオルガネラである。これらの相互作用は、それぞれの正常な機能に関わる可能性があり、そのメカニズムや生理的な意義の解明が待たれる。本研究では、真核細胞の基本原理の解明にすぐれた、細胞内形態が非常に単純な原始紅藻Cyanidioschyzon merolae（通称シゾン）を使い、真核細胞におけるミトコンドリアとリソソームの相互作用の分子メカニズムを解明することを目的としている。本年度は、ミトコンドリアとリソソームの相互作用のダイナミクスを詳細に明らかにするためのライブイメージング系の構築、分子メカニズムを解明するための相互作用に関わる因子の同定について進めた。系の構築では、シゾンを顕微鏡下で数時間に渡って観察できる条件を設定し、細胞周期におけるミトコンドリアの挙動を明らかにし、また、蛍光タンパク質によってリソソームを観察できる細胞株を作成した。因子の同定については、ミトコンドリアとリソソームの相互作用に関わる可能性のある2つのタンパク質について、HA-タグ融合株を作成し、間接蛍光抗体染色法によって細胞周期における挙動を明らかにした。これらのタンパク質はミトコンドリアとリソソームが相互作用する時期に、部分的にリソソームに局在することが分かった。

构成地球上许多生物的核细胞具有一个细胞器官，周围是独特的功能，例如细胞核，线粒体和溶酶体，即有机虫。众所周知，Olganella与不同类型的物理相互作用，已经发现这种相互作用与疾病和环境反应有关。线粒体是一个重要的有条理，可在细胞中提供能量产生，溶酶体负责在细胞中拆卸。这些相互作用可能与每个正常功能有关，并且正在等待机制和生理意义。在这项研究中，使用Cyanidioschyzon Merolae（通常称为Sison），使用线粒体和溶酶体相互作用的分子机制，其具有非常简单的细胞内形式，在天然细胞的基本原理中非常出色。目的是阐明。今年，我们继续构建实时成像系统，以详细阐明线粒体和溶酶体相互作用的动力学，并确定与相互作用相关的因素以阐明分子机制。在系统的构建中，设置了在显微镜下观察Sizon几个小时的条件，阐明了线粒体在细胞周期中的行为，并产生了细胞量，可以观察到具有荧光蛋白的溶酶体。关于因子的鉴定，可能与线粒体和溶酶体之间的相互作用相关的两种蛋白质创建，并创建了HA-TAG融合共同点，并通过间接荧光抗体染色方法揭示了细胞周期中的行为。发现当线粒体和溶酶体相互作用时，这些蛋白质部分位于溶酶体中。