線維の配向性を付与したスキャフォールドを用いた半月板横断裂に対する治療法の確立

定向纤维支架治疗半月板横向撕裂方法的建立

• 批准号: 15H06377
• 负责人: 下村 和範
• 金额: $ 1万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-08-28 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15H06377/
• 关键词: 再生医療; 整形外科

1、スキャフォールドの作製および評価エレクトロスピニング法にてε-カプロラクトン(PCL)およびポリエチレンオキサイド(PEO)をハイブリッドさせスキャフォールドを作製した。水溶性であるPEOをPBSへ浸水し除去、PCLスキャフォールドの密度を調整した。これらのスキャフォールドを1cm x 1cmの大きさで用意し、ウサギ膝関節滑膜組織より間葉系幹細胞を採取、スキャフォールドへ播種した。通常の培地(DMEM, 10%FBS)で最大１週間程度まで培養の後、細胞接着能および生存率を評価した。大部分（90％以上）の細胞の生存が確認され、細胞はスキャフォールドの表層を中心に接着が認められた。以上より、ウサギの細胞の使用に問題が無い事が示され、ウサギを用いた動物実験へと移行する方針となった。２、ウサギ膝関節半月板欠損モデルの作製麻酔下に、ウサギ膝関節を内側傍膝蓋アプローチにて展開し、内側関節面を露出した。内側半月板を十分に展開するため、内側側副靭帯の一部を切離し、内側半月前節に①横断裂の作製、②5mm幅の欠損、③前節全て（半月板の1/3）のいずれかの欠損を作製した。いずれの損傷も半月中心部から辺縁部まで作製した。一ヶ月後にサクリファイスを行ない、評価した。①では、半月損傷部に自然修復が認められ、半月損傷モデルとしては不適切であった。②および③において、半月板の自然修復は認められず、隣接する関節軟骨の変性が進行していた。以上より、②③共にモデルとして適していたが、スキャフォールドを移植・縫合時に、半月板実質が残存している方が、手術操作が容易となる事が期待され、今回のモデルとしては、②を採用する事とした。今後、順次スキャフォールドの移植を行い、解析を行なう予定である(平成28年度より、科研若手Aへ移行予定)。

1。脚手架的制备和评估是通过通过静电纺丝杂交ε-二甲酰胺（PCL）和聚乙烯氧化物（PEO）来制备脚手架的。水溶性PEO被浸入PBS中并去除，并调整了PCL支架的密度。这些支架以1 cm x 1 cm的尺寸制备，从兔膝关节的滑膜组织收集间充质干细胞，并播种到支架中。在正常培养基（DMEM，10％FBS）中进行长达1周的培养后，评估了细胞粘附能力和存活率。确认大多数（超过90％）的细胞存活，并且细胞的粘附为中心。从以上表明，使用兔细胞没有问题，该计划是使用兔子进行动物实验。 2。在麻醉下丢失兔膝关节的模型，使用内侧副伴侣方法部署兔膝关节，以暴露内侧关节表面。为了完全部署内侧半月板，切断了内侧侧支韧带的一部分，在内侧半月板的前一部分中，1）横向撕裂的形成，2）5毫米宽的缺陷，3）所有前一节的缺陷（弯面条的1/3）。所有损坏都是从半月份到边缘边缘的中心构成的。一个月后，进行了牺牲和评估。在1中，在半月损伤区域观察到了自然修复，这是不合适的半月损伤的模型。在②和③中，未观察到自然的弯月板修复，并且相邻关节软骨的变性正在进行中。基于上述情况，②和③都适合作为模型，但是预计如果半月板实质在植入和缝合脚手架时仍然存在，则将手术操作更容易，因此选择②作为该模型。脚手架将来将按顺序进行移植和分析（计划从2016年开始过渡到科学技术研究所A）。