血小板並びにTGF-β1によるエンドセリン-1産生促進作用とその病態生理学的意義

血小板和TGF-β1促进内皮素1生成及其病理生理意义

基本信息

批准号：
06836017
负责人：
松村靖夫
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Osaka University of Pharmaceutical Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至 1995
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06836017/
关键词：
エンドセリン-1 血管内皮細胞血小板 TGF-β1

项目摘要

血小板を培養血管内皮細胞に添加すると、エンドセリン-1(ET-1)遺伝子発現増加に伴ってET-1遊離が促進された。同様の作用は、血小板懸濁液を加温後、血小板を除去した上清画分を用いた場合にも認められた。血小板中に豊富に存在することが知られているtransforming growth factor-β1(TGF-β1)を内皮細胞に添加した場合もET-1産生は用量依存的に増加した。これらTGF-β1及び血小板上清画分によるET-1産生促進作用は抗TGF-β1中和抗体により有意に抑制されたことから、血小板はTGF-β1の遊離を介して内皮細胞におけるET-1産生を促進的に調節している可能性が示唆された。血小板を含む多くの細胞から放出されるTGF-β1は大部分が生物学的に不活性な潜在型であり、生物活性の発現には、潜在型から活性型への活性化が必須である。そこで、血小板のET-1産生促進作用におけるTGF-β1の役割をより明確にするため、潜在型TGF-β1を活性化する方法として知られている酸処理及び熱処理を上清画分に施し、血小板の作用におよぼす影響について調べた。ADPにより凝集を惹起した血小板の上清画分に含まれるTGF-β1は、大部分が潜在型であり、酸処理または熱処理により上清画分中の活性型TGF-β1濃度は約10倍に増加し、同時に、内皮細胞からのET-1遊離促進作用も有意に増強された。また酸処理及び熱処理は内皮細胞におけるET-1遺伝子発現についても増強作用を示したことより、これら血小板作用の増強効果は活性型TGF-β1の増加によるものと考えられた。酸処理及び熱処理を施した上清画分に相当する濃度のTGF-β1を内皮細胞に添加した場合、ET-1産生促進作用は酸処理及び熱処理を施した上清画分の作用に比し明らかに弱いものであった。また、熱処理を施した上清画分に抗TGF-β1中和抗体を併用した場合、ET-1産生促進作用に対し有意な抑制はみられたが、その抑制は完全なものではなかった。以上血小板は、TGF-β1の遊離を介して内皮細胞におけるET-1産生を遺伝子レベルから促進的に調節している可能性が示唆された。また本作用は、単に血小板の凝集(活性化)のみに依存するものではないことも示された。さらに、血小板によるET-1産生促進作用は、活性型TGF-β1濃度と正の相関を示すが、本作用は活性型TGF-β1に加えて、TGF-β1と血小板から同時に放出される他の血小板由来因子との相互作用によっても修飾されている可能性が示唆された。

当将血小板添加到内皮细胞中时，随着内塞1（ET-1）基因表达的增加，促进了ET-1 PLE。当使用血小板湿液用于去除血小板的枕头时，也识别出相同的效果。即使将生长因子-β1（TGF-β1）（TGF-β1）转化为血小板丰富，也被添加到内皮细胞中，剂量的ET-1产生增加。由于这些TGF-β1和平台上的血小板被抗TGF-β1中和器显着抑制，因此通过释放TGF-β1的内皮细胞中的血小板是ET-1。 TGF-β1从包括血小板在内的许多细胞中释放出来，主要是生物学上不活跃的，并且生物活性的表达需要从电位到活性类型的激活。因此，为了阐明TGF-β1在血小板ET-1促进作用中的作用，将酸处理和热处理被称为激活电势TGF-β1的方法研究了血小板的作用。大多数TGF-β1包含在由ADP引起的血小板上清液中的大多数是潜在类型，并且由于酸治疗或热处理，顶部清除层的活性TGF-β1浓度约为10倍。同时增加了内皮细胞的ET-1促进促进促进促进。此外，酸治疗和热处理还显示出内皮细胞中ET-1基因表达的增强作用，并且认为增强血小板作用的作用被认为是由于活性TGF-β1的增加所致。当将浓度等同于酸处理和热处理的浓度等效的TGF-β1被添加到内皮细胞中时，将ET-1产生促进效应与酸治疗和热处理的上清液的作用进行了比较。显然很虚弱。此外，当抗TGF-β1中和抗体一起用于水下处理的上清液时，ET-1产生促进效应得到了显着抑制，但是抑制并不完美。有人提出，血板可以通过将TGF-β1与遗传水平分离而促进内皮细胞中ET-1的产生。还表明，这种作用不仅取决于血小板聚集（激活）。此外，血小板的ET-1促进效应表明与活动的TGF-β1浓度有正相关，但是除了有活动的TGF-β1外，同时释放了TGF-β1和血小板的效果与血小板衍生因子的相互作用可能已经修改。