クラビニ酵素モデルの合成と機能に関する研究

Clavini酶模型的合成及功能研究

基本信息

批准号：
04671291
负责人：
米田文郎
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

フラビン酵素活性中心において、フラビン補酵素は一方の面が“タンパクの壁"で覆われており、他方の面でのみ基質分子と相互作用が可能な面不斉の環境におかれていると考えられる。このような面不斉の環境にあるフラビン補酵素のキラルな面は、基質分子との立体選択的な反応に重要な影響を及ぼしていると思われる。そこで、これらの影響を調べる目的でフラビン酵素モデルとして、面不斉5-デアザフラビン(5-dFl)である5-デアザフラビノサイクロファン(1)を設計、合成した。化合物(1)において、5-dFlの活性中心であるC(5)位の片方の面は、ほぼ完全に覆われており、反応は別の面でのみ進行することが予想された。化合物(1)は、[2.2]パラサイクロファンをニトロ化後、接触還元によりアミノ体とし、次いでアミノ基をモノアルキル化後、常法により環化して得られた。この化合物を光学活性HPLCで分離し、目的の光学活性5-デアザフラビノサイクロファン(1a)、(1b)を得ることができた。化合物(1)のX線結晶回析の結果から、C(5)位の一方の面は、[2.2]パラサイクロファンの芳香族プロトンにより完全に覆われていることがわかった。従って、この化合物を用いた反応は、予想通り別の面でのみ進行することが期待された。まず、エタノール中、室温下、ナトリウムボロハイドライド(NaBH_4)及びNaBD_4による還元反応と、NMR解析により、予想通り試薬はopen faceからのみ反応していることがわかった。次いで得られた還元体を空気酸化して、C(5)位のどちらの面のプロトンがはずれるかを検討したところ、同様に、open faceのプロトンのみが反応することがわかった。結局、化合物(1)は、その構造自身にアポ蛋白質の役割の1つであるsteric functionを有しているとみなせることから、フラボエンザイムモデルとなり得ることが判明した。

在黄素酶活性的中心，黄素 - 酶被认为被“蛋白质壁”覆盖，并且在一种可以与另一侧的底物分子相互作用的解释环境中。黄素化学物质在这种不对称环境中的手性方面似乎对与底物分子的三维反应产生了重要影响。因此，作为研究这些影响的目的，设计和合成了5-Deeraza Flavin Cycl（1），该酶模型是一种不对称的5-Deaza Flavin（5-DDFL）。在化合物（1）中，几乎完全覆盖了5-DFL的C（5）的一个表面，并且预计反应只会在另一个方面进行。 [2.2] parasaclofan（是氮气）获得了化合物（1），然后由于接触的返回而成为氨基体，然后是氨基组，然后由常规方法组成。该化合物通过光学活性HPLC分离，并获得所需的光学活性5-Deeraza Flavinoclofan（1a）和（1b）。从化合物（1）的X射线晶体循环的结果中，发现C（5）的一侧被[2.2]甲状动脉曲片芳香族质子完全覆盖。因此，预计使用该化合物的反应只能按预期进行。首先，据揭示了该试剂仅是从敞开的面反应的，正如乙醇，室温和NMR分析期间的钠ragged（NABH_4）和NABD_4的返回反应所预期的那样。在检查了所获得的减少身体后，去除了C（5）水平的质子，还发现只有张开的脸部质子响应。最后，事实证明，化合物（1）可以被视为一个空间函数，这是Apo-蛋白质本身的作用之一，因此它可以是黄酮酶模型。