細胞死におけるFas抗原の機能

Fas抗原在细胞死亡中的作用

基本信息

批准号：
04670171
负责人：
伊藤直人
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Osaka Bioscience Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至 1993
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04670171/
关键词：
Fas抗原細胞死自己免疫病 lpr シグナル伝達 T細胞アポトーシス

项目摘要

平成4年度の本研究では、まず、クローン化したヒトFas抗原cDNAをプローブとして、マウスFas抗原cDNAを単離し、その構造を決定した。マウスFas抗原cDNAをプローブとして、いろいろな組織におけるmRNAの発現量を調べた結果、胸腺、心臓、肝臓、肺、卵巣などで発現が認められた。さらに、Fas抗原遺伝子の制限酵素断片が、マウス種間で、多様性(RFLP)を示すことを用いた解析から、マウスFas抗原遺伝子は第19番目の染色体にマップされ、ほぼ同一の領域にマウスの変異遺伝子1pr(lymphoproliferation)が存在することが明らかになった。1pr変異を持つマウスでは、Fas抗原遺伝子に変異が存在し、Fas抗原のmRNAがほとんど発現されていないか、Fas抗原の細胞死を誘起する活性が失われていることが明らかになった。以上の結果から、Fas抗原は、1pr変異の構造遺伝子であることが示唆され、Fas抗原の機能が失われると、異常T細胞を蓄積するとともに、自己免疫疾患の症状を呈することからFas抗原はT細胞の細胞死を制御している可能性が示唆された。Fas抗原による細胞死のシグナル伝達機構を明らかにするために、マウスリンフォーマWR19L細胞にヒトFas抗原のcDNAを導入し、これを発現する細胞株を樹立した。この細胞は、抗Fas抗体で処理することにより細胞死が誘導される。ヒトFas抗原の欠失変異体を用いた解析の結果、細胞質ドメインの大部分が細胞死のシグナル伝達に必要とされることが明らかになった。Fas抗原とTNF受容体の細胞質ドメインの間で約70アミノ酸の領域が類似性を示し、この領域が細胞死のシグナル伝達に関与していることが示唆された。

在1992年的这项研究中，首先，使用克隆的人Fas抗原cDNA作为探针分离小鼠Fas抗原cDNA，并确定其结构。 Using mouse Fas antigen cDNA as a probe, the expression level of mRNA in various tissues was observed in the thymus, heart, liver, lungs, ovaries, etc. Furthermore, analysis using restriction enzyme fragments of the Fas antigen gene exhibit diversity (RFLP) between mouse species revealed that the mouse Fas antigen gene was mapped to chromosome 19, and that the mouse mutant gene 1pr （淋巴增生）存在于几乎同一区域。据显示，FAS抗原基因中存在突变，而Fas抗原mRNA的表达很少或FAS抗原抗原诱导的细胞死亡活性的损失在带有1PR突变的小鼠中。以上结果表明FAS抗原是1PR突变的结构基因，当Fas抗原失去其功能时，异常T细胞会累积并列出自身免疫性疾病的症状，这表明FAS抗原可能控制T细胞细胞细胞死亡。为了阐明FAS抗原细胞死亡的信号传导机制，将人Fas抗原的cDNA引入小鼠淋巴瘤WR19L细胞中，并确定了表达这一点的细胞系。用抗FAS抗体处理细胞以诱导细胞死亡。使用人FAS抗原的缺失突变体的分析表明，信号细胞死亡需要大多数细胞质结构域。大约70个氨基酸的区域显示出FAS抗原和TNF受体的细胞质结构域之间的相似性，这表明该区域参与细胞死亡的信号传导。