細胞死におけるFas抗原の機能

Fas抗原在细胞死亡中的作用

基本信息

批准号：
04670171
负责人：
伊藤直人
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Osaka Bioscience Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至 1993
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04670171/
关键词：
Fas抗原細胞死自己免疫病 lpr シグナル伝達 T細胞アポトーシス

项目摘要

平成4年度の本研究では、まず、クローン化したヒトFas抗原cDNAをプローブとして、マウスFas抗原cDNAを単離し、その構造を決定した。マウスFas抗原cDNAをプローブとして、いろいろな組織におけるmRNAの発現量を調べた結果、胸腺、心臓、肝臓、肺、卵巣などで発現が認められた。さらに、Fas抗原遺伝子の制限酵素断片が、マウス種間で、多様性(RFLP)を示すことを用いた解析から、マウスFas抗原遺伝子は第19番目の染色体にマップされ、ほぼ同一の領域にマウスの変異遺伝子1pr(lymphoproliferation)が存在することが明らかになった。1pr変異を持つマウスでは、Fas抗原遺伝子に変異が存在し、Fas抗原のmRNAがほとんど発現されていないか、Fas抗原の細胞死を誘起する活性が失われていることが明らかになった。以上の結果から、Fas抗原は、1pr変異の構造遺伝子であることが示唆され、Fas抗原の機能が失われると、異常T細胞を蓄積するとともに、自己免疫疾患の症状を呈することからFas抗原はT細胞の細胞死を制御している可能性が示唆された。Fas抗原による細胞死のシグナル伝達機構を明らかにするために、マウスリンフォーマWR19L細胞にヒトFas抗原のcDNAを導入し、これを発現する細胞株を樹立した。この細胞は、抗Fas抗体で処理することにより細胞死が誘導される。ヒトFas抗原の欠失変異体を用いた解析の結果、細胞質ドメインの大部分が細胞死のシグナル伝達に必要とされることが明らかになった。Fas抗原とTNF受容体の細胞質ドメインの間で約70アミノ酸の領域が類似性を示し、この領域が細胞死のシグナル伝達に関与していることが示唆された。

在1992年进行的这项研究中，我们首先使用克隆的人Fas抗原cDNA作为探针分离了小鼠Fas抗原cDNA并确定了其结构。我们以小鼠Fas抗原cDNA为探针，检测了各组织中mRNA的表达量，发现胸腺、心脏、肝脏、肺、卵巢等都有表达。此外，使用显示小鼠物种之间多样性的Fas抗原基因的限制性酶片段(RFLP)的分析表明，小鼠Fas抗原基因定位于第19号染色体，并且小鼠Fas抗原基因位于几乎相同的区域。揭示了突变基因 1pr（淋巴细胞增殖）的存在。结果发现，携带1pr突变的小鼠Fas抗原基因发生突变，要么几乎不表达Fas抗原mRNA，要么丧失Fas抗原诱导细胞死亡的活性。上述结果表明Fas抗原是一种具有1pr突变的结构基因，当Fas抗原功能丧失时，异常T细胞积聚并表现出自身免疫性疾病的症状，提示其可能控制T细胞死亡。为了阐明Fas抗原诱导的细胞死亡信号转导机制，我们将人Fas抗原cDNA导入小鼠淋巴瘤WR19L细胞并建立表达它的细胞系。通过抗 Fas 抗体处理，在这些细胞中诱导细胞死亡。使用人类 Fas 抗原的缺失突变体进行的分析表明，大部分细胞质结构域是细胞死亡信号传导所必需的。大约 70 个氨基酸的区域显示 Fas 抗原和 TNF 受体的细胞质结构域之间的相似性，表明该区域参与细胞死亡信号传导。