血管平滑筋細胞内Ca貯蔵部に発見された電位感受性Ca放出現象の細胞生理学的研究

血管平滑肌细胞内Ca储存区发现的电压敏感Ca释放现象的细胞生理研究

• 批准号: 07833009
• 负责人: 山本 博道
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07833009/
• 关键词: 血管平滑筋細胞; カルシウムイオン; 1価イオン; 情報伝達; カルシウム放出; バリノマイシン

1.ラット大動脈初代培養平滑筋細胞をサポニン処理し、Ca-45を用いてATP依存性Ca貯蔵部からのCa流出を測定した。2.スキンド細胞用緩衝液中の130mM KClをLiCl、Tris・HCl、NH4Cl、塩化コリン、Sucrose等で等張性に置換すると、Ca-45流出率は増加したが、RbCl、CsCl、NaClの場合は変化しなかった。Valinomycinはこの反応を抑制または修飾した。以上の結果から、貯蔵部膜上に電位感受性Ca遊離チャンネルが存在しそれが開口された可能性が示唆された。3.KClを上記1価陽イオンまたはSucroseにて置換し、イノシトール三燐酸(IP3)によるCa遊離に対する効果をみた。無カルシウム緩衝液と300nMCa存在下の二つの条件について検討した。置換後の膜電位変化がIP3誘発Ca遊離を抑制する程度から、逆に膜電位変化の大きさ、さらに各1価陽イオンの相対的膜透過性順位を推定できた。4. Valinomycin処理は300μMCa存在下のIP3によるCa遊離に影響しなかった。Valinomycin処理はKCl/塩化アンモニウム置換によるCa-45流出率の一過性上昇を抑制し、300μMCaの存在下のIP3によるCa遊離を増加させた。Sucroseや塩化コリンへの置換の場合は影響を受けなかった。5.いくつかのカリウムチャンネルブロッカーは塩化アンモニウム置換によるCa遊離を抑制したが、IP3によるCa遊離隔には影響しなかった。KCl/塩化アンモニウム置換により誘発されるCa遊離が貯蔵部膜のK透過性の変化に影響されるものであり、IP3感受性Ca遊離チャンネルを介するものではないことが示唆された。6.以上の結果から、ラット大動脈中膜由来初代培養平滑筋細胞の細胞内Ca貯蔵部には電位感受性Ca遊離機構が存在し、IP3感受性Ca遊離機構とは異なる可能性が示唆された。

1. 用皂苷处理原代培养的大鼠主动脉平滑肌细胞，并使用 Ca-45 测量 ATP 依赖性 Ca 储存的 Ca 流出。 2.将skind细胞缓冲液中的130mM KCl等浓度替换为LiCl、Tris·HCl、NH4Cl、氯化胆碱、蔗糖等时，Ca-45流出率增加，但使用RbCl、CsCl、NaCl时则没有增加。改变。缬氨霉素抑制或改变了这种反应。这些结果表明，储库膜上存在电压敏感的 Ca 释放通道，并且可能会打开。 3.用上述一价阳离子或蔗糖代替KCl，考察肌醇三磷酸(IP3)对Ca释放的​​影响。研究了两种条件：无钙缓冲液和存在 300 nMCa。根据取代后膜电位变化抑制 IP3 诱导的 Ca 释放的程度，我们能够估计膜电位变化的幅度以及每种单价阳离子的相对膜渗透性排名。 4.在300μMCa存在下，缬氨霉素处理不影响IP3诱导的Ca释放。缬氨霉素处理抑制了 KCl/氯化铵替代引起的 Ca-45 流出率的短暂增加，并在 300 μMCa 存在的情况下增加了 IP3 的 Ca 释放。用蔗糖或氯化胆碱替代没有效果。 5.一些钾通道阻滞剂抑制氯化铵取代诱导的Ca释放，但不影响IP3诱导的Ca释放螯合。这些结果表明，KCl/氯化铵替代诱导的 Ca 释放受到储库膜 K 渗透性变化的影响，而不是由 IP3 敏感的 Ca 释放通道介导。 6、上述结果提示，原代培养的大鼠主动脉中膜来源的平滑肌细胞的细胞内Ca储存区存在电压敏感的Ca释放机制，该机制可能与IP3敏感的Ca释放机制不同。

项目成果

平田結喜緒: "血管分子生物学" メディカルレビュー社, 239 (1995)

平田幸雄：《血管分子生物学》医学评论出版，239（1995）