血管平滑筋細胞内Ca貯蔵部に発見された電位感受性Ca放出現象の細胞生理学的研究

血管平滑肌细胞内Ca储存区发现的电压敏感Ca释放现象的细胞生理研究

• 批准号: 07833009
• 负责人: 山本 博道
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07833009/
• 关键词: 血管平滑筋細胞; カルシウムイオン; 1価イオン; 情報伝達; カルシウム放出; バリノマイシン

1.ラット大動脈初代培養平滑筋細胞をサポニン処理し、Ca-45を用いてATP依存性Ca貯蔵部からのCa流出を測定した。2.スキンド細胞用緩衝液中の130mM KClをLiCl、Tris・HCl、NH4Cl、塩化コリン、Sucrose等で等張性に置換すると、Ca-45流出率は増加したが、RbCl、CsCl、NaClの場合は変化しなかった。Valinomycinはこの反応を抑制または修飾した。以上の結果から、貯蔵部膜上に電位感受性Ca遊離チャンネルが存在しそれが開口された可能性が示唆された。3.KClを上記1価陽イオンまたはSucroseにて置換し、イノシトール三燐酸(IP3)によるCa遊離に対する効果をみた。無カルシウム緩衝液と300nMCa存在下の二つの条件について検討した。置換後の膜電位変化がIP3誘発Ca遊離を抑制する程度から、逆に膜電位変化の大きさ、さらに各1価陽イオンの相対的膜透過性順位を推定できた。4. Valinomycin処理は300μMCa存在下のIP3によるCa遊離に影響しなかった。Valinomycin処理はKCl/塩化アンモニウム置換によるCa-45流出率の一過性上昇を抑制し、300μMCaの存在下のIP3によるCa遊離を増加させた。Sucroseや塩化コリンへの置換の場合は影響を受けなかった。5.いくつかのカリウムチャンネルブロッカーは塩化アンモニウム置換によるCa遊離を抑制したが、IP3によるCa遊離隔には影響しなかった。KCl/塩化アンモニウム置換により誘発されるCa遊離が貯蔵部膜のK透過性の変化に影響されるものであり、IP3感受性Ca遊離チャンネルを介するものではないことが示唆された。6.以上の結果から、ラット大動脈中膜由来初代培養平滑筋細胞の細胞内Ca貯蔵部には電位感受性Ca遊離機構が存在し、IP3感受性Ca遊離機構とは異なる可能性が示唆された。

1。用皂苷和Ca依赖性Ca储存剂用皂苷和Ca外排处理大鼠主动脉初级培养的平滑肌细胞，使用CA-45测量。 2。当Skind细胞缓冲液中的130 mM KCl被LICL，TRIS·HCl，NH4CL，NH4CL，氯化胆碱，蔗糖等取代时，CA-45外排率会增加，但RBCL，CSCL和NaCl的情况没有改变。缬氨霉素抑制或修改了该反应。以上结果表明，存储膜上存在潜在潜在的ca自由通道，并可能已经打开了它。 3。KCl被上述单价阳离子或蔗糖取代，观察到三磷酸肌醇（IP3）对Ca释放的​​影响。研究了两个条件，包括无钙缓冲液和300 NMCA。相反，可以估计膜电位变化的大小和每个单一阳离子的相对膜渗透率排名的大小抑制IP3诱导的Ca释放后膜电位变化的程度。 4。在存在300μmCa的情况下，val霉素治疗不会影响IP3的CA释放。 Valinomycin处理抑制了由于KCl/氯化铵取代而导致的CA-45外排率的瞬时增加，并在300μMCA的存在下通过IP3释放CA释放。用蔗糖或氯化胆碱的取代没有影响。 5。几个钾通道阻滞剂抑制了由于氯化铵取代而抑制了CA释放，但由于IP3而不会影响CA释放。有人提出，由KCL/氯化铵取代引起的CA释放受储层膜K渗透率的变化的影响，而不是通过IP3敏感的CA释放通道。 6。上述结果表明，在源自大鼠主动脉介质的原代培养平滑肌细胞的细胞内CA储存中存在潜在敏感的CA释放机制，这可能与IP3敏感的CA释放机制不同。

项目成果

平田結喜緒: "血管分子生物学" メディカルレビュー社, 239 (1995)

平田幸雄：《血管分子生物学》医学评论出版，239（1995）