成長ホルモン作用異常の分子遺伝学的研究

生长激素功能障碍的分子遗传学研究

基本信息

批准号：
07671138
负责人：
加冶秀介
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

GH分泌不全のない成長障害の原因の一つにGH作用異常があり、GH基礎値、反応値高値、IGF-I低値が臨床的特徴である。GH受容機構のなかで、特にGHおよびGH受容体(GHR)分子の異常を検出しえた症例の結果を報告する。最初の症例はGH遺伝子にArg77Cysの変異をヘテロに認めた男児で血中GHを等電点電気泳動(IEF)で解析すると野性型、変異型GHがほぼ等量発現していた。大腸菌で作成した変異GHは野性型GHに比し、GHBPと数倍高い親和性をもち、さらにIM9細胞で変異型GHによるチロシンリン酸化能は野性型GHの存在、非存在下で低下した。以上よりこの変異GHは優勢阻害的に作用していることが判明した(NEJM334, 432-436, 1996)。また変異GHをトリプシン処理後、非還元下、逆相HPLCで分離、変異GHにおいてのみ認めるピークを単離し、ペプチドシークエンスしたところ、変異によって生じたCysが異常なS-S結合を形成し、立体構造がGH分子の特にsite 1において変化し、GHBP親和性の変化の原因になっていると考えられた。第2の症例はGH遺伝子にヘテロなミスセンス変異Asp112Glyを認めた女児で、IEFでは血中GHは変異型が優位に発現し、大腸菌で作成した変異GHによるチロシンリン酸化能が低下していた。これら2症例ではGH治療の適応が考えられ試みている。第3の症例は血中GHBP (pmole/L)は測定感度以下(<15.6)、GH投与でIGF-1無反応のラロン症候群の女児でGHR細胞外ドメインにヘテロなノンセンス変異Glu224stopを新たに認めた。同様のgenotypeの母ではGHBPは98.6で身長も正常範囲であったことから父由来のアレルにGHRの発現を抑制する原因があると考えられた。現在IGF-I治療を行っている。

没有GH分泌失败的生长障碍的原因之一是异常的GH作用，临床特征是基础GH值，高响应值和低IGF-I值。我们报告了GH和GH受体（GHR）分子异常的病例结果，尤其是能够检测到GH受体机制异常的情况。第一个病例是一个男孩，他的GH基因中有异源突变，当通过等电聚焦（IEF）分析血液GH时，发现野生和突变的GH表示几乎相等。在大肠杆菌中产生的突变GH与GHBP的亲和力比野生型GH的亲和力高几倍，而在IM9细胞中，在存在和不存在野生型GH的情况下，突变体GH的酪氨酸磷酸化能力降低。从以上发现该突变体GH以主要抑制作用的作用（NEJM334，432-436，1996）。胰蛋白酶吸引后，在非还原下通过反向相HPLC分离突变体GH，仅在突变型GH中观察到的峰并分离出肽。突变产生的Cys形成异常的S-S结合，在GH分子的位点1中更改了构象，从而导致GHBP亲和力的变化。第二例是一个女孩，在GH基因中具有异源的错义突变Asp112gly，在IEF中，主要表达了血液GH的突变形式，并且由大肠杆菌中产生的突变体引起的酪氨酸磷酸化能力降低。这两种情况被认为是GH治疗的适应症。第三种情况是在没有对IGF-1反应的Laron综合征的女孩中GHR细胞外域中的一种新的胡说八道突变GLU224STOP。在类似基因型的母亲中，GHBP为98.6，在正常范围内，因此人们认为父子等位基因抑制了GHR表达。目前正在接受IGF-I治疗。