強免疫原性黒色腫抗原ペプチドとHLA結合に関する解析ならびに特異的T細胞株の樹立

强免疫原性黑色素瘤抗原肽与 HLA 结合分析及特异性 T 细胞系的建立

• 批准号: 07670948
• 负责人: 林部 一人
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 1996
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670948/
• 关键词: 悪性黒色腫; 抗腫瘍免疫療法; ワクチン; 黒色腫関連抗原; 遺伝子工学; 組み換え蛋白質; 主要組織適合抗原

当研究計画の初年度として、強免疫原性ヒト悪性黒色腫抗原および、2のコードする遺伝子の組織分布を皮膚においては、黒色腫細胞にほぼ限局している事を確認した上で、黒色腫患者血清中の当該抗原に対する抗体価を測定した。高力価群と低力価群に分類し、とくに高力価を示す患者群内でのHLA パフロタイプを血清学的に解析し特有のHLA typeと相関があるのかを検討した。その結果、本邦ではHLA-A33が有意に高力価と相関することが判明した。臨床上の観察として、当組み換え抗原の能動免疫療法中の抗体価の変動および併用するインターフェロンの効果を検討した。現状ではインターフェロン・ベータの併用の効果は抗体価の上昇としてはあらわれず、In Vitroにおいてインターフェロン・ベータが示した培養細胞における抗原発現増強作用の結果と単価には合致しなかった。また、課題であるAutologous systemによる細胞障害活性の測定は、患者からの黒色腫およびリンパ球の同時樹立が困難なため、平成6年度における1例にとどまっているが、今後も継続する予定である。当組み換え蛋白抗原特異的T細胞株の樹立に関しては、患者末梢血リンパ球および腫瘍浸潤リンパ球を用いてIL-2存在下に末梢リンパ球(irradiated)をfeederとして施行しているが、当初のリンパ球数拡大には有用であるが、clonalな拡大には及ばないことが判明した。諸報告を参照してIL-6などの添加が有用ではないかと考えている。とくにHLA-A33の患者で行う必要性があるかもしれない。臨床成績ではstage TVの患者においても、当能動免疫療法の施行群では現在のところ再発例はない。

在这个研究项目的第一年，我们确认了高免疫原性的人类恶性黑色素瘤抗原和编码2的基因的组织分布几乎局限于皮肤中的黑色素瘤细胞，并测量了患者血清中针对该抗原的抗体滴度。 。我们将患者分为高滴度组和低滴度组，并对高滴度患者组中的HLA泡芙型进行血清学分析，以检查是否与特定HLA类型存在相关性。结果发现，HLA-A33与日本的高滴度显着相关。作为临床观察，我们研究了使用这种重组抗原的主动免疫治疗期间抗体滴度的变化以及伴随干扰素的作用。目前，干扰素β联合使用的效果并不表现为抗体效价的增加，而且单价与干扰素β增强体外培养细胞抗原表达能力的结果也不相符。此外，使用自体系统测量细胞毒性活性是一项挑战，由于难以同时建立患者的黑色素瘤和淋巴细胞，因此在 1994 年仅限于一例，但我们计划在未来继续这样做.关于这种重组蛋白抗原特异性T细胞系的建立，我们在IL-2存在下使用患者外周血淋巴细胞和肿瘤浸润淋巴细胞作为饲养细胞，但最初发现对于扩大淋巴细胞计数是有用的，但不适用于克隆扩增。基于各种报告，我们相信添加IL-6等可能是有用的。可能有必要执行此操作，尤其是对于 HLA-A33 患者。临床结果表明，主动免疫治疗组没有复发，即使是TV期患者也是如此。

项目成果

Kako, S.et al: "Tissue Distribution of a Melanoma-Associated Antigen Immunogenic in Patients with Melanoma Analyzed by Polyclonal Antibodies to Recombinant Peptide Antigen" The Journal of Dermatology. 23(印刷中). (1996)

Kako, S. 等人：“通过重组肽抗原的多克隆抗体分析黑色素瘤患者中黑色素瘤相关抗原免疫原性的组织分布”，《皮肤病学杂志》23（出版中）。