糸状菌の生産するグルコース転移酵素の反応特性とオリゴ糖合成

丝状真菌葡萄糖转移酶的反应特性及寡糖合成

• 批准号: 07660116
• 负责人: 林 幸男
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: University of Miyazaki
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07660116/
• 关键词: グルコース転移酵素; オ-レオバシディウム属菌; オリゴ糖; パノース; イソマルトース; 固定化

(1)酵素反応特性の検討 Aureobasidium属菌グルコース転移酵素の最適反応pH及び温度が5及び65℃であり、pH4-8及び60℃以下で安定であることを示した。本酵素が高濃度マルトースに作用し、パノースとイソマルトースのイソマルトオリゴ糖を約55%の収率で生成することを明らかにした。パノースを出発物質とした時イソマルトースを生成し、イソマルトースからパノースが生成されなかったので、まずパノースが生成しさらに分解しイソマルトースが生成すると考えられた。また、本酵素はマルトトリオース、マルトテトラオースを基質としても、転移反応を示すことを明らかにした。比較のための研究室保存株であるAspergillus属菌のグルコース転移酵素について検討した結果、グルコースを縮合しイソマルトースを生成した。他に報告されている酵素とも酵素特性を比較し、本酵素の特徴がパノースを主生成物とするところにあることを明らかにした。(2)固定化酵素によるオリゴ糖生産 本酵素の包括法(アルギン酸ゲル担体)、イオン交換法(DEAE-セルロース担体)、共有結合法(アミノシラン化シリカゲル担体)による固定化を試み、アルギン酸ゲル及びDEAE-セルロースへそれぞれ71および41%の高い固定化率で固定化することに成功した。また、本酵素の水銀、銀、アルミニウムなどの金属イオンやニトリロ三酢酸、モノヨード酢酸などの阻害剤に対する安定性を極めて向上させた。アルギン酸ゲル固定化酵素をカラムに充填し、高濃度マルトースを基質として連続反応を試みた結果、半減期は約64日で、長期操作が可能なシステムの構築に成功した。

（1）酶反应特征金黄色卵巢的最佳反应反应pH和葡萄糖转移酶的温度为5和65°C，表明它在PH4-8和60°C或更少的情况下稳定。据揭示，该酶作用于高浓度麦芽糖以产生panse-和 - 异藻异构型公鸡，其产率约为55％。当使用Panse用作出发物质时，会产生异构体，并且不会从Isomarutos产生Panthes，因此人们认为Panthse会被分解并产生异构体。该酶还揭示了它与底物（例如麦芽膜和马特特拉澳大利亚州）的底物显示出一种转移反应。由于检查了葡萄糖转移酶，该酶是一种实验室保留的菌株以进行比较，将葡萄糖凝结以产生异构体。将酶特性与其他报道的酶进行比较，据显示，该酶的特性是Panthes是主要产物的地方。 （2）固定的酶试图固定寡糖（凝胶载体），离子交换方法（DEAE -CLULULOSE载体）和共享法律（氨基烷基化的硅胶载体），并尝试固定算然的凝胶和DEAE纤维素，我们成功地以71％和41％的高固定速率固定了它。此外，对于氮s剂量乙酸和抑制剂等抑制剂，该酶的金属离子（例如汞，银，铝等）的稳定性得到了极大改进。由于柱中的固定藻酸固定酶的结果，具有高浓度麦芽糖的连续反应，一半寿命约为64天，并且成功构建了系统。

项目成果

Haruhiko Yokoi: "Characteristics of a biopolymer floculant product procuced by Bacillus sp.PY-90" Journal of Fermentation and Bioengineering. 79. 378-380 (1995)

Haruhiko Yokoi：“由芽孢杆菌 sp.PY-90 生产的生物聚合物絮凝剂产品的特性”发酵与生物工程杂志。

Haruhiko Yokoi: "Characteristics of hydrogen production by acidic Enterobacter aerogenes strain HO-39" Journal of Fermentation and Bioengineering. 80. 571-574 (1995)

Haruhiko Yokoi：“酸性产气肠杆菌菌株 HO-39 产氢的特征”发酵与生物工程杂志。

Sachio Hayashi: "Stabilities of the deglycosylated Aspergillus β-fructofuranosidase" Bulletin of the Faculty of Engineering,Miyazaki Univ.41. 73-76 (1995)

Sachio Hayashi：“去糖基化曲霉 β-呋喃果糖苷酶的稳定性”宫崎大学工学部通报 73-76 (1995)。

Sachio Hayashi: "Immobilization of glucosyltransferase from Aureobasidium" Journal of Industrial Microbiology. 14. 377-381 (1995)

Sachio Hayashi：“来自 Aureobasidium 的葡萄糖基转移酶的固定化”工业微生物学杂志。